[發(fā)明專利]一種提取分離玄參波利苷A的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210360044.6
• 申請日: 2012-09-25
• 公開（公告）號: CN102863491A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然植物有效成分提取分離領(lǐng)域，涉及一種玄參波利苷A的方法，特別涉及一種利用動態(tài)逆流提取、大孔樹脂吸附和高速逆流色譜純化技術(shù)相結(jié)合的方法提取分離玄參波利苷A的方法。

背景技術(shù)

玄參波利苷A（Scropolioside?A）是一種環(huán)烯醚萜苷類化合物，主要從玄參科植物凱氏玄參或斯科波利玄參中分離得到。藥理研究表明，玄參波利苷A具有抗肝毒活性，在口服6mg/kg時，對大鼠硫乙酰胺肝中毒的生化指標(biāo)保護(hù)率分別為：GOT25.74%、GPT45.29%、ACP44.32%、ALP79.82%和GIDH73.63%。玄參波利苷A分子式為C₃₅H₄₄O₂₈，分子量為752.72，結(jié)構(gòu)式為：

。

李宗友報道了凱氏玄參中環(huán)烯醚萜苷類成分的分離方法，采用90%乙醇室溫滲濾提取，提取液水浴上減壓濃縮，粗提取物經(jīng)液液分配柱層析等方法得到環(huán)烯醚萜苷單體成分。該方法操作繁瑣、所得產(chǎn)品含量較低、提率低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，提供一種玄參波利苷A的制備方法，應(yīng)用高速逆流色譜分離純化玄參波利苷A，操作簡單、樣品損失少、產(chǎn)品純度高。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案：

（1）提取：以凱氏玄參為原料，粉碎，置于液體動態(tài)連續(xù)逆流提取裝置中，以65-80%的食用乙醇溶液為提取溶劑，提取2-3次，合并提取液；

（2）柱層析：將上述提取液旋轉(zhuǎn)濃縮，濃縮液加水分散，過濾，濾液上大孔樹脂，先用水洗脫，再用4-6BV55%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；

（3）高速逆流色譜分離：將步驟（2）所得乙醇洗脫液濃縮、干燥，干燥物采用高速逆流色譜法對所得粗品進(jìn)行分離純化，制備得到玄參波利苷A。

所述步驟（1）中液體動態(tài)連續(xù)逆流裝置為多個提取裝置串聯(lián)或并聯(lián)或串并聯(lián)合用，每次提取乙醇溶液用量為原料質(zhì)量的3-5倍（v/w）。

所述步驟（3）中高速逆流色譜法分離溶劑系統(tǒng)選用正庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為（15-17）：（12-14）：（20-25）：（3-7），溶劑系統(tǒng)配制后靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，流動相流速控制在1.5-4.0ml/min，主機轉(zhuǎn)速控制在800-950r/min。

本發(fā)明的有益效果是：

1、采用液體動態(tài)連續(xù)逆流提取技術(shù)，通過循環(huán)的提取液不斷地將有效成分提取出來，縮短了提取周期和溶劑的用量；

2、將大孔樹脂和高速逆流色譜技術(shù)結(jié)合，分離制備玄參波利苷A，工藝簡單、質(zhì)量穩(wěn)定、產(chǎn)品純度高。

具體實施方式：

下面將結(jié)合具體實施方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

將凱氏玄參地上部分低溫干燥、粉碎，取5kg，平均置于3個串聯(lián)的提取裝置中，加入20L70%的乙醇溶液，在50℃的提取溫度下，提取2次，每次2.5h，合并提取液，過濾后得到提取液，旋轉(zhuǎn)濃縮，加水分散，過濾，濾液通過AB-8型大孔吸附樹脂柱，吸附完成后，先用水洗脫至無色，再用5BV的55%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥得到玄參波利苷A粗品，采用高速逆流色譜法對所得粗品進(jìn)行分離純化，按體積比為16:13:25:7配制正庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)，溶劑系統(tǒng)混勻后靜置分層，以上相為固定相，下相為流動相，將固定相充滿高速逆流色譜柱，開啟主機轉(zhuǎn)速調(diào)至820r/min，泵入下相作流動相，動態(tài)平衡后，流動相流速控制在2.5ml/min，將粗品溶于下相由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，HPLC檢測，收集目標(biāo)成分，減壓濃縮干燥流分，得到玄參波利苷A，含量96.4%。

實施例2：