[發明專利]以鴨血為原料小分子血肽血紅素鐵和血漿蛋白的生產工藝無效
| 申請號: | 201210357355.7 | 申請日: | 2012-09-24 |
| 公開(公告)號: | CN102887947A | 公開(公告)日: | 2013-01-23 |
| 發明(設計)人: | 劉偉;劉成梅;楊水兵;鐘業俊;吳孛;徐慧 | 申請(專利權)人: | 南昌大學 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;C07K1/34;C12P21/06;C07D487/22 |
| 代理公司: | 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122 | 代理人: | 夏材祥 |
| 地址: | 330031 江西省*** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 原料 分子 血紅素 血漿 蛋白 生產工藝 | ||
1.一種以鴨血為原料小分子血肽血紅素鐵和血漿蛋白的生產工藝,其特征是:
(1)鴨血的抗凝抗氧化處理:采用2?g/L的抗壞血酸作為抗氧化劑,添加量為血量的0.05%-0.1%;以及4?g/L的檸檬酸三鈉作為抗凝劑,添加量為血量的16.7%;
(2)離心處理:采用4000r/min離心30min,上清液為血漿,離心沉淀物為血細胞;
(3)血漿等電點沉淀:用0.5mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液將血漿的pH調整到4.9,將沉淀離心沉淀后,用清水洗滌至中性除雜,獲得血漿蛋白溶液;
(4)血漿蛋白的噴霧干燥:將血漿蛋白溶液調整濃度在25%-30%,然后進行噴霧干燥,血漿蛋白的噴霧干燥條件進風溫度為190-195℃,出風溫度為90-95℃,獲得血漿蛋白粉產品;
(5)血細胞的溶血破胞:將步驟(2)離心處理獲得的沉淀物血細胞通過冷熱交替變溫即-20℃和90℃的方法使部分血細胞溶血,之后在120MPa動態超高壓微射流均質機下處理1次進行破胞得到血紅蛋白;
(6)階段酶解的控制:分兩個階段,第一階段在pH?8.5,溫度55℃下,采用0.5%的堿性蛋白酶酶解2.5h;第二階段在pH值7.0,反應溫度50℃,采用0.3%中性蛋白酶和0.2%風味蛋白酶同步酶解時間4.8h,得到深度酶解液;
(7)滅酶、離心:將步驟(6)酶解得到的酶解液升溫至85℃加熱30min進行滅酶處理,將滅酶處理后的溶液進行離心,將血漿蛋白粗粗提液的pH值調至4.5,靜置2h,4000r/min離心30?min,收集沉淀;上清液為血肽溶液,離心沉淀物為血紅素;
(8)乙酸、乙醇和清水洗滌:將步驟(7)離心沉淀物進行洗滌純化,采用體積比10%的醋酸和30%的乙醇各洗滌一次,然后用清水洗滌至中性;
(9)血紅素鐵的噴霧干燥:將步驟(8)乙酸、乙醇和清水洗滌后得到的血紅素鐵溶液,調整濃度在25%-30%,然后進行噴霧干燥,血紅素鐵的噴霧干燥條件為進風溫度195-200℃,出風溫度為90-95℃,獲得血紅素鐵粉產品;
(10)血肽的脫苦脫色處理:將步驟(7)滅酶離心得到的上清液進行脫苦脫色處理,在pH4.0,溫度為50℃時,使用2%羧甲基淀粉鈉對酶解上清液處理1h;
(11)小分子血肽的反滲透超濾分級純化:在操作壓力29psi下,使用截留分子量為3000Da的多功能分級分離設備對小分子血肽進行純化,可得到不同分子量段的小分子血肽;
(12)小分子血肽的噴霧干燥:將步驟(11)小分子血肽的分級純化的溶液調整到濃度在25%-30%,小分子血肽的干燥條件為進風溫度為175-180℃,出風溫度為90-95℃,獲得小分子血肽粉產品。
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