[發明專利]一種快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡及其制備方法

有效

• 申請號: 201210355770.9
• 申請日: 2012-09-21
• 公開（公告）號: CN102879583A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 田伏洲;任建東
• 申請（專利權）人: 田伏洲;任建東
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

技術領域

本發明涉及臨床診斷領域，尤其涉及一種快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡及其制備方法

背景技術

胰腺創傷和急性胰腺炎是臨床上常見的急危重病，若不及時治療往往危及患者生命，因此對胰腺創傷和急性胰腺炎的及時診斷對于挽救患者的生命非常重要。

目前胰腺創傷和急性胰腺炎的常規診斷主要是測定腹腔滲出液及血液中的淀粉酶活性，以其活性的急劇升高作為診斷依據，但該方法的準確性欠佳，因為仍然有部分患者測得的淀粉酶活性沒有較大的變化。另外還通過APACHE?II評分對胰腺創傷和急性胰腺炎進行診斷，但該評分方法過于繁瑣，若評分不足則容易導致患者病情延誤；若評分過高則容易導致治療過渡，因此該評分方法也不能滿足對胰腺創傷和急性胰腺炎的快速診斷的要求。

近年來，隨著研究的深入，發現在急性胰腺炎和胰腺創傷發生時，胰蛋白酶原被激活時產生一個小分子肽，叫做胰蛋白酶原激活肽(TAP)，該分子在腹水、血液以及尿液中含量的升高與急性胰腺炎和胰腺創傷的發生密切相關，通過TAP含量測定不僅可以診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的病情，還可以對患者預后進行有效評估，因此有研究者開始把該分子作為急性胰腺炎和胰腺創傷的特異性診斷物并取得良好的效果。

目前對TAP的檢測方法主要是酶聯免疫吸附法(ELISA)，但該方法耗時較長(4～5小時)，還需要特定的吸光度檢測儀器和專業人員操作，另外價格也較貴，因此不能滿足對病情快速診斷的要求，更不適合在基層醫療機構使用。申請人在使用中發現，公開號CN101609093A的發明專利申請在實際使用中存在以下問題，因層析膜、吸水墊、過濾墊均由易吸濕的材料制備，在實際使用中常常因環境濕度較大和存放時間較長而降低材料的性能，繼而影響測試卡的測試準確度實驗發現使用依照CN101609093A的測試卡測試約100個樣品，使用酶聯免疫吸附法(ELISA)驗證有近15％的假陽性(誤差率)，而且使用依照CN101609093A的測試卡不能同時對待測樣品作平行和對照測試，降低了測試的準確性。更不能實現對測試樣品大致定量的作用。

發明內容

本發明的目的是提供一種適合現場使用的，檢測方便快速、靈敏度和準確度高、性能穩定、成本低廉的快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡及其制備方法，該測試卡通過設置多個加樣孔，可同時進行待測樣品的平行測試和陰性、陽性對照測試，通過設置防水薄膜，以及使用微孔濾膜作為過濾墊，使測試結果更加準確可靠。

本發明所依據的原理是：待檢樣品中的TAP與結合墊上的膠體金標記的TAP單克隆抗體特異性結合，結合物以及被樣品中的水份溶解的膠體金標記的單克隆抗體在層析作用的推動下向試紙另一端移動，當移動至包被TAP多克隆抗體的測試線時，形成雙抗體夾心復合物并聚集顯色，而游離的膠體金標記的TAP單克隆抗體在移動到質控線時與兔抗小鼠免疫球蛋白抗體捕獲并顯色以表明測試卡的有效性。

本發明的技術方案為：

一種快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡及其制備方法，包括：

塑料外殼，所述塑料外殼上部設置有加樣孔和觀察窗，其中所述加樣孔的數量為至少三個，所述多個加樣孔沿所述塑料外殼寬度的方向等距離分布在所述塑料外殼的一端，所述加樣孔和所述觀察窗上固定有一層透明的防水薄膜；

底襯，所述底襯以粘接的方式固定于所述塑料外殼內底部；

檢測模塊，所述檢測模塊包括層析膜、結合墊、樣品墊、過濾墊和吸水墊，所述結合墊、樣品墊和過濾墊從下至上依次粘接在所述層析膜上面對應于所述加樣孔的一端，其中所述過濾墊位于所述檢測模塊的最上層，并對應于所述加樣孔的位置，所述吸水墊設置于所述層析膜上面的另一端，所述層析膜上設置有測試線和質控線，所述測試線為包被的TAP多克隆抗體，所述質控線為包被的兔抗小鼠免疫球蛋白抗體，所述層析膜與底襯粘接在一起。

優選的是，所述的快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡中，所述底襯上設置有多個縱向平行排列的凹槽；所述檢測模塊為多個，其數量與所述底襯的凹槽數量一致，并分別粘貼于所述底襯的各個凹槽內，彼此之間由所述凹槽的側壁隔開，所述加樣孔對應于所述凹槽內檢測模塊上部的位置。

優選的是，所述的快速診斷胰腺創傷和急性胰腺炎的測試卡中，所述結合墊、樣品墊和過濾墊的長度小于所述層析膜的長度，對應于所述塑料外殼上部加樣孔的位置，且其邊緣不超過所述觀察窗的左側邊緣；所述吸水墊的長度小于所述層析膜的長度，且其邊緣不超過所述觀察窗的右側邊緣。