[發(fā)明專利]一種從流蘇花中提取木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210355537.0
• 申請日: 2012-09-24
• 公開（公告）號: CN102898488A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉普;鄧瑞雪;趙天增;董建軍;陳榮峰;尹衛(wèi)平
• 申請（專利權(quán)）人: 河南省生物技術(shù)開發(fā)中心
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 劉建芳;楊海霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物有效成分提取及分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從流蘇花中提取木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法。

背景技術(shù)

木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，又名青蘭苷（Cymaroside），是一種黃酮苷類化合物。其英文名為Luteolin-7-O-β-D-glucoside，分子式：C₂₁H₂₀O₁₁，分子量：448，結(jié)構(gòu)式為：

。

木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷為淡黃色無定型粉末，UV₃₆₅下有強烈的紫外吸收。

流蘇（Chionanthus?retusa?Lindl?et?Paxt）為木犀科流蘇樹屬植物，國家二級保護(hù)植物。又名花木、蘿卜絲花、油根子、牛荊子、四月雪，為落葉小喬木或灌木，高可達(dá)20米。研究表明，流蘇中含有黃酮、苷類、裂環(huán)環(huán)烯醚萜、木脂素、香豆素、多糖等多種有效成分。其中黃酮類化合物為流蘇花中較為重要的一種成分，是一類具有廣泛生物活性的物質(zhì)，前期的研究發(fā)現(xiàn)，藥材流蘇花中含有較多的黃酮苷類化合物—木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

文獻(xiàn)報道黃酮苷類化合物木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有多種藥理活性，如抗生物氧化、抗炎、止痙、抗組胺的作用，以及抗癌、抗輻射等諸多生物活性。因此，關(guān)于木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的規(guī)模化制備分離的研究就顯得頗為重要。目前，尚未見到從植物流蘇花中提取分離木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種從植物流蘇花中提取分離木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法，該方法過程簡單，提取所得的木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷純度高，適于從流蘇花中規(guī)模化的制備木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種從流蘇花中提取木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法，其包括以下步驟：

1）將粉碎過的干燥流蘇花，用體積濃度70－95%乙醇在40－60℃條件下浸泡提取8－10h，過濾殘渣，殘渣重復(fù)浸泡提取2－5次，合并提取液，真空減壓濃縮至浸膏；

2）將浸膏與浸膏質(zhì)量20－30倍的水混旋，然后依次用溶劑石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，每種溶劑萃取2－5次，收集正丁醇所對應(yīng)的萃取液，真空減壓濃縮得正丁醇提取物；

3）將正丁醇提取物用醇類有機溶劑（如甲醇或乙醇等，添加量一般為正丁醇提取物重量的3－7倍）溶解，過濾，濾液中加入正丁醇提取物1－3質(zhì)量倍的硅膠混勻，揮干醇類有機溶劑，然后用硅膠柱層析分離（硅膠柱中硅膠的用量以是提取物質(zhì)量的20－30倍為宜），依次用體積比為7:?1、5:?1的氯仿-甲醇洗脫液進(jìn)行梯度洗脫，取氯仿-甲醇體積比為5:?1所對應(yīng)的洗脫液，真空減壓干燥，備用；

4）取洗脫所得樣品用甲醇溶解，過濾，濾液室溫放置后有黃色固體析出，固體干燥后即為含量大于90%的木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷粗品。

具體的，步驟1）中所述體積濃度70－95%乙醇的添加量為干燥流蘇花質(zhì)量的10－20倍。

步驟2）中溶劑石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的添加量優(yōu)選為水用量的1/3，每種溶劑萃取3次。

比較優(yōu)選的，將木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷粗品溶于溫度為45－55℃的甲醇（甲醇添加量為木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷粗品質(zhì)量的2－4倍）中，過濾，濾液于-5－5℃重結(jié)晶，即得含量大于95%的木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷成品。

和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法的優(yōu)點在于方法簡便，快捷，所得到產(chǎn)品純度高，收率高，可以用于從流蘇花中較大規(guī)模的制備木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，為該化合物今后的開發(fā)研究奠定了基礎(chǔ)。

附圖說明

圖1為采用本發(fā)明方法制得的木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的¹H?NMR圖譜；

圖2為采用本發(fā)明方法制得的木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的¹³C?NMR圖譜。

具體實施方式

以下以通過優(yōu)選實施例對本發(fā)明工藝作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。

實施例1

一種從流蘇花中提取木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法，其包括以下步驟：