[發(fā)明專利]檢測IL28B(rs8099917)和ITPA(rs1127354)的突變的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210353290.9 | 申請日: | 2012-09-14 |
| 公開(公告)號: | CN102994629A | 公開(公告)日: | 2013-03-27 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 黑瀨薰;細(xì)見敏也 | 申請(專利權(quán))人: | 愛科來株式會社 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京東方億思知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11258 | 代理人: | 肖善強(qiáng) |
| 地址: | 日本*** | 國省代碼: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 檢測 il28b rs8099917 itpa rs1127354 突變 方法 | ||
1.一種多態(tài)性檢測用探針,其是用于檢測IL28B基因的多態(tài)性的探針,其特征在于包含下述P1或P1’的熒光標(biāo)記寡核苷酸,
(P1)寡核苷酸,其具有包含序列編號1所示的堿基序列中的第301~307位的堿基的堿基長為7~28的堿基序列或與之同源的序列,且與第307位的堿基對應(yīng)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記;
(P1’)寡核苷酸,其具有在嚴(yán)格條件下與包含序列編號1所示的堿基序列中的第301~307位的堿基的堿基長為7~28的堿基序列的互補(bǔ)鏈雜交的序列,且與第307位的堿基對應(yīng)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記。
2.一種多態(tài)性檢測用探針,其是用于檢測TIPA基因的多態(tài)性的探針,其特征在于包含選自下述P2~P3’中的至少一種的熒光標(biāo)記寡核苷酸,
(P2)寡核苷酸,其具有與包含序列編號2所示的堿基序列中的第239~251位的堿基的堿基長為13~28的堿基序列互補(bǔ)的序列或與之同源的序列,且與第239位的堿基互補(bǔ)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記;
(P2’)寡核苷酸,其具有在嚴(yán)格條件下與包含序列編號2所示的堿基序列中的第239~251位的堿基的堿基長為13~28的堿基序列雜交的序列,且與第239位的堿基互補(bǔ)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記;
(P3)寡核苷酸,其具有包含序列編號2所示的堿基序列中的第251~256位的堿基的堿基長為6~42的堿基序列或與之同源的序列,且與第256位的堿基對應(yīng)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記;
(P3’)寡核苷酸,其具有在嚴(yán)格條件下與包含序列編號2所示的堿基序列中的第251~256位的堿基的堿基長為6~42的堿基序列的互補(bǔ)鏈雜交的序列,且與第256位的堿基對應(yīng)的堿基為胞嘧啶并用熒光染料標(biāo)記。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的探針,其中,
P1和P1’的寡核苷酸在從3’末端起數(shù)第1位~第3位的位置具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第307位堿基對應(yīng)的堿基,
P2和P2’的寡核苷酸在從3’末端起數(shù)第1位~第3位中的任何的位置具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第239位堿基互補(bǔ)的堿基,
P3和P3’的寡核苷酸在從3’末端起數(shù)第1位~第3位中的任何的位置具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第256位堿基對應(yīng)的堿基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的探針,其中,
P1和P1’的寡核苷酸在3’末端具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第307位堿基對應(yīng)的堿基,
P2和P2’的寡核苷酸在3’末端具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第239位堿基互補(bǔ)的堿基,
P3和P3’的寡核苷酸在3’末端具有經(jīng)熒光染料標(biāo)記的與第256位堿基對應(yīng)的堿基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4中任意一項所述的探針,所述熒光標(biāo)記寡核苷酸在未與靶標(biāo)序列雜交的時候發(fā)出熒光,并且與靶標(biāo)序列雜交的時候熒光強(qiáng)度減少或增加。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的探針,所述熒光標(biāo)記寡核苷酸在未與靶標(biāo)序列雜交的時候發(fā)出熒光,并且在與靶標(biāo)序列雜交的時候熒光強(qiáng)度減少。
7.根據(jù)權(quán)利要求1~6中任意一項所述的探針,其中,
P1和P1’的寡核苷酸的堿基長為7~23,
P2和P2’的寡核苷酸的堿基長為13~23,
P3和P3’的寡核苷酸的堿基長為6~27。
8.根據(jù)權(quán)利要求1~6中任意一項所述的探針,其中,
P1和P1’的寡核苷酸的堿基長為7~18,
P2和P2’的寡核苷酸的堿基長為13~18,
P3和P3’的寡核苷酸的堿基長為6~22。
9.根據(jù)權(quán)利要求1~8中任意一項所述的探針,所述探針是用于熔解曲線分析的探針。
10.一種IL28B基因或ITPA基因中的多態(tài)性的檢測方法,其特征在于使用權(quán)利要求1~9中任意一項所述的探針。
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