[發明專利]浙貝母PCR鑒定試劑盒及鑒定方法

有效

• 申請號: 201210350761.0
• 申請日: 2012-09-20
• 公開（公告）號: CN102899409A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 李敏;趙欣;黃龍妹;陳劍
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/12
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種浙貝母PCR鑒定試劑盒，其特征在于所述試劑盒中的特異性引物為ZB1和ZB2：

ZB1：5'-ACAGTACTGGGGGAGAAGTC-3'，

ZB2：5'-CAAATGGAGGGTATGTGTCG-3'。

2.如權利要求1所述的浙貝母PCR鑒定試劑盒，其特征在于所述試劑盒的組成為：

3.一種適于權利要求1所述試劑盒的浙貝母基因，其特征在于所述基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1所示。

4.一種利用權利要求1所述浙貝母PCR鑒定試劑盒對浙貝母進行鑒定的方法，其特征在于所述方法為：

（1）模板DNA的提取和質量鑒定：提取供試品DNA作為PCR的模板；以電泳法檢測模板DNA的質量，條帶清晰無彌散的，即為符合PCR反應的模板DNA；

（2）PCR鑒定：利用浙貝母PCR鑒定試劑盒中的特異性引物ZB1和ZB2進行PCR擴增：

PCR反應溶液：

將PCR反應溶液放入PCR自動擴增儀器中進行PCR擴增反應，反應程序設置為：95℃預變性5min，95℃變性30s，52～60℃復性30s，72℃延伸2min，30個循環，最后72℃延伸5min；

（3）PCR產物進行電泳檢測：取出PCR擴增后的反應液5μL與加樣緩沖液1μL混合，用1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增結果，在719bp處出現擴增條帶的為浙貝母，在719bp處不出現擴增條帶的不是浙貝母。