[發明專利]樟樹無性系組培繁育方法

有效

• 申請號: 201210346936.0
• 申請日: 2012-09-19
• 公開（公告）號: CN102860258A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 曾令海
• 申請（專利權）人: 廣東省林業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務所有限公司 44228
• 代理人: 劉媖

1.樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）外植體材料的消毒：取當年生嫩梢去掉葉片，切段，使每段為帶有1~2個腋芽的莖段，莖段先用0.2%滅菌凈消毒10～20min，無菌水清洗6次，再用0.1%升汞，2～5滴吐溫80，處理3～5min，無菌水清洗6次，消毒后備用；（2）芽的誘導：把步驟（1）經消毒的莖段，接種到芽的誘導培養基上，經過6～15d的培養，在腋芽處開始萌動，并長出新芽，所述的誘導培養基為DCR_改＋6-BA?0.3mg+NAA?0.05～0.5mg；?（3）芽的增殖：將步驟（2）長出的新芽培養30d后，將新芽切割下來，接到繼代增殖培養基上培養，在增殖培養基培養6～15d，就會形成叢生芽，所述的增殖培養基為DCR_改＋6-BA?0.5～3mg?+NAA?0.05～0.5mg?+IAA?0.05～2mg或DCR_改＋6-BA?0.5～4mg?+NAA?0.05～1mg；?

（4）生根誘導：步驟（3）的叢生芽的單芽長到1.5～2cm左右長時，選取葉片展開的單芽，分割下來接到生根培養基中誘導生根，在生根培養基中培養7～10d，莖基部誘導出根，所述的生根培養基為1/2MS+IBA?1.5～2.5mg?+IAA?1.5～2.5mg?+6-BA?0～0.5mg+NAA?0.05～0.5mg；?（5）生根苗的煉苗：經過生根誘導，當苗誘導生根后，將瓶苗置于有70%遮蔭的大棚中煉苗30～40d后，苗高3cm以上，可進行移栽；

（6）組培苗的移栽與管理：將步驟（5）進行煉苗的樟樹苗移栽至消毒的基質上，移載時，把根放進預先打好的小孔中，使根系舒展，充分壓實，使根土密接，要防止栽植過深、窩根或露根，移栽后澆透水；栽植后用塑料薄膜作小拱狀蓋好小苗保濕，遮蔭60-80%；為防止病害，移苗后當天噴防病藥劑800－1000倍菌毒清液或多菌靈一次，以后每周噴藥劑一次，3d后逐漸打開塑料薄膜，15天后全部打開，待小苗長出新葉時方可開始薄施肥，1個月后，可進行正常的水肥管理。

2.根據權利要求1所述的樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：步驟（6）所述的基質為泥炭土和黃心土配制而成的混合基質，其混合比為泥炭土:黃心土=1:4。

3.根據權利要求1所述的樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：步驟（6）所述的消毒是采用0.1%高錳酸鉀溶液消毒。

4.根據權利要求1所述的樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：所述的誘導培養和增殖培養的培養基均添加蔗糖30g/L，生根階段的培養基添加蔗糖20g/L，全部培養基均添加卡拉膠0.6～0.7%，pH值為5.8。

5.根據權利要求1所述的樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：培養室的培養條件：培養條件25～30℃，每天光照12～16h，光照度為1500～3000lx。

6.根據權利要求1所述的樟樹無性系組培繁育方法，其特征在于：所述的DCR_改培養基的組成及其含量為：NH₄NO₃800?mg/L、KNO₃?680?mg/L、KH₂PO₄?400?mg/L、CaCl₂·2H₂O?170?mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O?1112?mg/L、MgSO₄·7H₂O?740?mg/L?、FeSO₄·7H₂O?27.8?mg/L?、Na₂-EDTA??37.3?mg/L?、MnSO₄·4H₂O?22.3?mg/L?、ZnSO₄·7H₂O?8.6?mg/L?、H₃BO₄?6.2?mg/L?、KI?0.83?mg/L?、Na₂MoO₄·2H₂O?0.25?mg/L?、CuSO₄·5H₂O?0.025?mg/L?、CoCl₂·6H₂O?0.025?mg/L?、肌醇?100?mg/L?、甘氨酸?2?mg/L?、VB_1??0.1?mg/L?、VB₆?0.5?mg/L?、VC?2?mg/L?、VB_3??0.5?mg/L?、L-半胱氨酸5?mg/L、糖?30000?mg/L?。