[發明專利]一種從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法

有效

• 申請號: 201210346555.2
• 申請日: 2012-09-18
• 公開（公告）號: CN102850417A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 常建紅;董維珍
• 申請（專利權）人: 成都瑞芬思生物科技有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 北京中海智圣知識產權代理有限公司 11282
• 代理人: 朱永飛;齊蘇平

技術領域

本發明涉及一種從植物中分離水晶蘭苷單體的方法，尤其涉及一種從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，屬于水晶蘭苷單體的制備領域。

背景技術

鹿銜草為《中國藥典》一部收載的中藥品種，是鹿蹄草科植物鹿蹄草（Pyrola?callianthaH·Andres）或普通鹿蹄草（P·decorateH·Andres）的干燥全草，具有祛風濕、強筋骨、止血等功效。現代藥理學研究表明，鹿銜草對心血管系統有一定的作用，并具有抗菌、抗炎、鎮痛等活性。其化學成分中以水晶蘭苷為主要成分的環烯醚萜苷類是生物活性的基礎成分。

水晶蘭苷（monotropein）具有較強的抗炎、鎮痛作用，分子式為：C16H22O11；分子量為：390.34，結構式如下：

現有水晶蘭苷單體的純化技術中，多采用反復硅膠柱層析等傳統方法，其生產周期長，且存在水晶蘭苷與其它雜質不易分離的情況，使得產品純化困難、純度不高，其質量和數量難以滿足需要。

專利申請號為20101015031.5的中國發明專利申請公開了一種從巴戟天中提取水晶蘭苷的方法，以巴戟天為原料，先乙醇超聲提取，然后用聚酰胺樹脂分離，最后通過重結晶得到水晶蘭苷的產品。這種方法工藝看似簡單，但收率較低，而且產品的純度也不高，得不到單體成分，純度難以達到98%以上。

專利號為ZL?200910311303.4的中國發明專利也公開了一種從巴戟天中提取水晶蘭苷的方法，先進行乙醇熱提取，然后通過乙酸乙酯萃取、正丁醇萃取、過濾進一步除雜、通過制備型高效液相色譜分離水晶蘭苷單體、大孔樹脂富集、干燥制得水晶蘭苷單體產品。這種技術缺點在于：一般重結晶工藝目標成分損失量較大，萃取不完全造成產品損失，而且萃取工藝步驟繁瑣，要重復操作，且試劑消耗量較大，另外，制備高效液相純化產品對原料要求高，原料為澄清溶液，顏色不能太深，否則對柱子填料損害厲害，且難以分離極性等性質極相近的成分，所以制備型高效液相不適合分離巴戟天中的水晶蘭苷；水晶蘭苷不是巴戟天藥材的主成分，在巴戟天藥材中含量低，且存在與水晶蘭苷性質相近的雜質，難以除去，所以選巴戟天為原料生產水晶蘭苷，難以得到水晶蘭苷的單體成分，即使能得到收率也很低，所以該技術很難實用于生產。

發明內容

本發明的目的就在于為了解決上述問題而提供一種從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，該方法能分離出高純度的水晶蘭苷單體。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術方案：

本發明所述從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，包括以下步驟：

（1）備料：將干燥后的鹿銜草粉碎為2～5mm的段；

（2）回流提取：用極性溶劑對粉碎的鹿銜草進行回流提取，鹿銜草質量與極性溶劑體積的比例為1:（10～30），單位分別是千克和升，提取溫度為40℃～80℃，提取時間為5～10h；

（3）富集：取步驟（2）獲得的濃縮液，上AB-8大孔樹脂進行一次吸附，吸附完全后依次用水、濃度為20～40%的乙醇溶液、濃度為80～95%的乙醇溶液解析，收集濃度為20～40%的乙醇解析液，濃縮至無醇，然后再次吸附，吸附完全后用濃度為70～90%的乙醇溶液解析，收集解析液，于40～60℃濃縮至浸膏，然后用60-80目硅膠拌樣，干燥成分散的顆粒狀原料，備用；

（4）分離：將200-300目硅膠置于體積比為25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液中濕法裝柱，分離柱直徑為10～30cm，用體積比為25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液平衡分離柱，平衡好后，按質量比為原料:硅膠=1:（2～4）的比例上步驟（3）得到的顆粒狀原料，然后用體積比為20:1～5:1的乙酸乙酯-甲醇溶液梯度洗脫，乙酸乙酯-甲醇溶液中加入三聚磷酸鈉固體，乙酸乙酯-甲醇溶液體積與三聚磷酸鈉固體質量的比例為1:（0.5～2），單位分別是升和克，收集洗脫液為目標產品溶液，即得到水晶蘭苷的粗溶液，于40℃～60℃減壓回收試劑，得到水晶蘭苷粗品；

（5）脫鹽干燥：將步驟（4）所得的水晶蘭苷粗品用水溶解，上活化好的MCI填料分離柱，先用水洗脫，水洗液丟棄，然后用濃度為60～80%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，于40～60℃減壓濃縮至干，然后真空常壓干燥或冷凍干燥，得到水晶蘭苷單體。MCI填料為一種聚苯乙烯基的反相樹脂填料。