[發(fā)明專(zhuān)利]一種從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210346555.2
• 申請(qǐng)日: 2012-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102850417A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 常建紅;董維珍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都瑞芬思生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07H17/04
• 分類(lèi)號(hào): C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 北京中海智圣知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11282
• 代理人: 朱永飛;齊蘇平

1.一種從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）備料：將干燥后的鹿銜草粉碎為2～5mm的段；

（2）回流提取：用極性溶劑對(duì)粉碎的鹿銜草進(jìn)行回流提取，鹿銜草質(zhì)量與極性溶劑體積的比例為1:（10～30），單位分別是千克和升，提取溫度為40℃～80℃，提取時(shí)間為5～10h；

（3）富集：取步驟（2）獲得的濃縮液，上AB-8大孔樹(shù)脂進(jìn)行一次吸附，吸附完全后依次用水、濃度為20～40%的乙醇溶液、濃度為80～95%的乙醇溶液解析，收集濃度為20～40%的乙醇解析液，濃縮至無(wú)醇，然后再次吸附，吸附完全后用濃度為70～90%的乙醇溶液解析，收集解析液，于40～60℃濃縮至浸膏，然后用60-80目硅膠拌樣，干燥成分散的顆粒狀原料，備用；

（4）分離：將200-300目硅膠置于體積比為25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液中濕法裝柱，分離柱直徑為10～30cm，用體積比為25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液平衡分離柱，平衡好后，按質(zhì)量比為原料:硅膠=1:（2～4）的比例上步驟（3）得到的顆粒狀原料，然后用體積比為20:1～5:1的乙酸乙酯-甲醇溶液梯度洗脫，乙酸乙酯-甲醇溶液中加入三聚磷酸鈉固體，乙酸乙酯-甲醇溶液體積與三聚磷酸鈉固體質(zhì)量的比例為1:（0.5～2），單位分別是升和克，收集洗脫液為目標(biāo)產(chǎn)品溶液，即得到水晶蘭苷的粗溶液，于40℃～60℃減壓回收試劑，得到水晶蘭苷粗品；

（5）脫鹽干燥：將步驟（4）所得的水晶蘭苷粗品用水溶解，上活化好的MCI填料分離柱，先用水洗脫，水洗液丟棄，然后用濃度為60～80%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，于40～60℃減壓濃縮至干，然后真空常壓干燥或冷凍干燥，得到水晶蘭苷單體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，其特征在于：所述步驟（1）中，鹿銜草為鹿銜草的葉和莖中的一種或兩種；所述步驟（2）中，鹿銜草質(zhì)量與極性溶劑體積的比例為1:20，單位分別是千克和升；極性溶劑為濃度為60%～80%的乙醇溶液；提取溫度為60℃，提取時(shí)間為6h；所述步驟（3）中，一次吸附中，吸附完全后依次用水、濃度為30%的乙醇溶液、濃度為90%的乙醇溶液解析；再次吸附中，吸附完全后用濃度為80%的乙醇溶液解析，收集解析液，于50℃濃縮至浸膏，然后用60-80目硅膠拌樣；所述步驟（4）中，將200-300目硅膠置于體積比為20:1的乙酸乙酯-甲醇溶液中濕法裝柱，分離柱直徑為20cm，用體積比為20:1的乙酸乙酯-甲醇溶液平衡分離柱；原料:硅膠=1:3；用體積比為15:1～5:1的乙酸乙酯-甲醇溶液梯度洗脫；乙酸乙酯-甲醇溶液體積與三聚磷酸鈉固體質(zhì)量的比例為1:1，單位分別是升和克；收集體積比為10:1的乙酸乙酯-甲醇溶液洗脫下來(lái)的溶液為目標(biāo)產(chǎn)品溶液；于50℃減壓回收試劑；所述步驟（5）中，用濃度為70%的乙醇溶液洗脫；于50℃減壓濃縮至干。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，極性溶劑為濃度為70%的乙醇溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從鹿銜草中分離水晶蘭苷單體的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，回流提取分三次進(jìn)行，合并三次的提取液為最終提取液。