[發明專利]解淀粉芽孢桿菌Ba168及其發酵培養方法和應用

有效

• 申請號: 201210342838.X
• 申請日: 2012-09-14
• 公開（公告）號: CN102839142A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 楊軒;翟楓;楊長鎖;安德榮
• 申請（專利權）人: 楊凌綠都生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種解淀粉芽孢桿菌Ba168，CGMCC?No.6462，該解淀粉芽孢桿菌Ba168的16SrDNA如序列表1所示。

2.解淀粉芽孢桿菌Ba168的發酵方法，其特征在于：所述發酵方法是以權利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168為原料，包括下述步驟：

(1)、菌種活化：將解淀粉芽孢桿菌Ba168菌種接種到LB試管斜面上面，于30℃活化培養48h，所述LB培養基配方為酵母浸膏5g，蛋白胨10g，NaCl?5g，瓊脂15～20g，水1000ml，pH?7.4～7.6，連續轉接3代，確保菌株純度后，再接種到種子液中使用。

(2)、種子液的制備：從斜面上挑取菌接種到裝有LB培養基的三角瓶中，于恒溫振蕩培養箱中振蕩培養，即得到種子液，所述的LB培養基配方為：蛋白胨10g，NaCl?10g，水1L，酵母浸膏5g，pH7.0；

(3)、發酵培養：將種子液先后進行種子罐發酵培養和大規模工業發酵培養，得到發酵液；其中種子罐發酵培養和大規模工業發酵培養步驟如下：

種子罐發酵培養：FJ液體培養基，裝料系數0.7，培養條件：26～28℃，48h，接種量：9%，通氣量：2.5L/min，攪拌轉速：200r/min；

大規模工業發酵培養：FJ液體培養基（20~36T），裝料系數0.7，培養條件：26～28℃，60~70h，接種量：9%，通氣量：2.0L/min，攪拌轉速：150r/min；

所述的FJ液體培養基配方為：黃豆餅粉2%，葡萄糖1%，淀粉1.5%，CaCO₃0.25%，K₂HPO₄?0.05%，MgSO₄·7H₂O?0.25%，FeSO₄·7H₂O?0.25%，其余為水，所列百分比為質量分數。

3.由權利要求2所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168發酵方法制備所得的發酵液。

4.解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑的制備方法，其特征在于：所述制備方法是以由權利要求3所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168發酵液為原料，包括下述步驟：

(1)、過濾濃縮發酵液：用草酸調節pH至4.5~5.0后，將發酵液通過截留分子量40000～100000k的無機陶瓷超濾膜過濾分離，操作溫度為25~45℃，膜通量為50~60LMH，被截留在膜的進液側的溶液為芽孢溶液，芽孢溶液濃縮倍數為6-7倍；

(2)、噴霧干燥：向濃縮后的發酵液中添加發酵液質量1.0%的白炭黑、微細滑石粉、輕質碳酸鈣或2500目超細重鈣填料；再將芽孢溶液經噴霧制成粉末，即得到解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑，其中噴霧干燥的進口溫度為170~190℃，出口溫度為65~85℃，進料速度60mL/min，噴頭壓力0.10MPa。

5.解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑由權利要求1所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168發酵制備所得。

6.解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑，其特征在于：所述解淀粉芽孢桿菌Ba168是以由權利要求3所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168發酵液為原料，通過下述方法制備所得：

(1)、過濾濃縮發酵液：用草酸調節pH至4.5~5.0后，將發酵液通過截留分子量40000~100000k的無機陶瓷超濾膜過濾分離，操作溫度為25~45℃，膜通量為50~60LMH，被截留在膜的進液側的溶液為芽孢溶液，芽孢溶液濃縮倍數為6-7倍；

(2)、噴霧干燥：向濃縮后的發酵液中添加發酵液質量1.0%的白炭黑、微細滑石粉、輕質碳酸鈣或2500目超細重鈣填料；再將芽孢溶液經噴霧制成粉末，即得到解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑，其中噴霧干燥的進口溫度為170~190℃，出口溫度為65~85℃，進料速度60mL/min，噴頭壓力0.10MPa。

7.權利要求1所述一種解淀粉芽孢桿菌Ba168、權利要求3所述的發酵液以及權利要求6所述的解淀粉芽孢桿菌Ba168殺菌劑在制備防治由尖孢鐮刀菌屬引起的作物根腐病藥物中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：所述由尖孢鐮刀菌屬引起的作物根腐病為白術根腐病、西洋參根腐病和三七根腐病。