[發明專利]焦磷酸測序法檢測PPARγ基因多態性的試劑盒及方法無效

申請號：	201210339004.3	申請日：	2012-09-13
公開（公告）號：	CN102876787A	公開（公告）日：	2013-01-16
發明（設計）人：	周宏灝	申請（專利權）人：	周宏灝
主分類號：	C12Q1/68	分類號：	C12Q1/68
代理公司：	長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113	代理人：	盧宏
地址：	410078 湖南省長沙市開***	國省代碼：	湖南;43
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摘要：
搜索關鍵詞：	磷酸測序法檢測 ppar 基因多態性試劑盒方法
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【權利要求書】：

1.一種焦磷酸測序法檢測PPARγ基因多態性的試劑盒，其特征在于，包括如下引物：

（1）擴增引物：

上游引物：5′-AAACCCCTATTCCATGCTGTTA-3′；

下游引物：5′-TTACATAAATGCCCCCACGTC-3′；

其中，下游引物的5′進行生物素標記；

（2）測序引物：5′-AAGGAATCGCTTTCTG-3′。

2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測PPARγ基因多態性的方法，包括如下步驟：

（1）DNA提取；

（2）聚合酶鏈反應：

配制50μl?PCR擴增體系，包含：10×PCR?buffer?5.0μl，dNTP?1.5μl，上游引物0.5μl，下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水41.0μl，模板1.0μl；循環程序為：95°C?5min預變性；依次在95°C?30S，50°C?30S，72°C?30S，進行35個循環；72°C保持5min，最終保持在4°C，得擴增產物；

（3）焦磷酸測序單鏈樣本純化；

（4）焦磷酸測序及結果分析。

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