[發(fā)明專利]一種兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210336241.4 | 申請(qǐng)日： | 2012-09-12 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103667404A | 公開（公告）日： | 2014-03-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 余龍江;白云;周蓬蓬 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 華中科技大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12P19/62 | 分類號(hào)： | C12P19/62;C12R1/01 |
| 代理公司： | 華中科技大學(xué)專利中心 42201 | 代理人： | 曹葆青 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 國(guó)省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 階段 控制 提高 殺菌 產(chǎn)量 方法 | ||
1.一種兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，在刺糖多孢菌發(fā)酵液制備階段，當(dāng)刺糖多孢菌發(fā)酵一開始時(shí)，調(diào)控初始氧體積傳質(zhì)系數(shù)kLa至100／小時(shí)-130／小時(shí)，促進(jìn)刺糖多孢菌生物量積累；當(dāng)發(fā)酵進(jìn)入到菌體生長(zhǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期時(shí)，再調(diào)控初始氧體積傳質(zhì)系數(shù)kLa至60／小時(shí)-92／小時(shí)，促進(jìn)多殺菌素合成與積累。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，所述調(diào)控是指調(diào)節(jié)通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，在刺糖多孢菌發(fā)酵液制備階段之前，該方法還依次包括以下階段：刺糖多孢菌的孢子制備階段；刺糖多孢菌的一級(jí)種子液制備階段；以及刺糖多孢菌的二級(jí)種子液制備階段。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的孢子制備階段具體包括下述過程：
將刺糖多孢菌凍干管中的凍干粉轉(zhuǎn)接進(jìn)入斜面培養(yǎng)基中，活化后經(jīng)過N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍化學(xué)誘變、紫外線物理誘變和原生質(zhì)體融合，得到改良菌株；
所述斜面培養(yǎng)基中含有葡萄糖：10.0-15.0；酪蛋白：2.0-3.0；酵母粉：1.0-2.0；瓊脂；15.0-20.0，單位均為克/升。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的一級(jí)種子液制備階段具體包括下述過程：
將所述刺糖多孢菌的孢子制備階段制得的活化后刺糖多孢菌孢子接入刺糖多孢菌的一級(jí)種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)制得刺糖多孢菌一級(jí)種子液；
所述每升一級(jí)種子培養(yǎng)基含有葡萄糖：10.0-15.0；酵母粉：2.0-2.5；酪蛋白：2.0-2.5；K2HPO4：0.2-0.4；MgSO4：0.3-0.4，單位均為克/升。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的二級(jí)種子液制備階段具體包括下述過程：
將所述刺糖多孢菌的一級(jí)種子液制備階段制得的一級(jí)種子液以10%（v/v）接種量接入二級(jí)種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)制得刺糖多孢菌的二級(jí)種子液；
所述每升二級(jí)種子液培養(yǎng)基中含有葡萄糖：10.0-15.0；酵母粉：2.0-2.5；大豆蛋白胨：8.0-10.0；K2HPO4：0.2-0.4；MgSO4：0.3-0.4，單位均為克/升。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3中任一所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，在所述刺糖多孢菌發(fā)酵液制備階段中，在發(fā)酵開始前，是將所述刺糖多孢菌的二級(jí)種子液制備階段制得的二級(jí)種子液以10%（v/v）接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行培養(yǎng)，所述每升發(fā)酵培養(yǎng)基中含有葡萄糖：60.0-70.0；麥芽糖：10.0-20.0；棉籽粉：20.0-25.0；大豆蛋白胨：8.0-10.0；酵母粉：20.0-25.0；CaCO3：1.0-1.5；K2HPO4：0.2-0.4；豆油：10.0-15.0，單位均為克/升。
8.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的兩階段溶氧控制提高多殺菌素產(chǎn)量的方法，其特征在于，在所述刺糖多孢菌發(fā)酵液制備階段中，在發(fā)酵開始前，是將所述刺糖多孢菌的二級(jí)種子液制備階段制得的二級(jí)種子液以10%（v/v）接種量接入發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行培養(yǎng)，所述每升發(fā)酵培養(yǎng)基中含有葡萄糖：60.0-70.0；麥芽糖：10.0-20.0；棉籽粉：20.0-25.0；大豆蛋白胨：8.0-10.0；酵母粉：20.0-25.0；CaCO3：1.0-1.5；K2HPO4：0.2-0.4；豆油：10.0-15.0，單位均為克/升。
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