[發明專利]用于制備抗鰻利斯頓氏菌的卵黃抗體的滅活疫苗制法有效
| 申請號： | 201210335928.6 | 申請日： | 2012-09-12 |
| 公開（公告）號： | CN102836431A | 公開（公告）日： | 2012-12-26 |
| 發明（設計）人： | 張曉君;畢可然;陳麗;閆斌倫;秦國民 | 申請（專利權）人： | 淮海工學院 |
| 主分類號： | A61K39/395 | 分類號： | A61K39/395;A61P31/04 |
| 代理公司： | 南京眾聯專利代理有限公司 32206 | 代理人： | 劉喜蓮 |
| 地址： | 222000 江蘇省連云港市新*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 制備 抗鰻利斯頓氏菌 卵黃 抗體 疫苗 制法 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于制備抗鰻利斯頓氏菌的卵黃抗體的滅活疫苗制法，其特征在于：該方法以病原鰻利斯頓氏菌BH1（Listonella?anguillarum?BH1）經甲醛溶液滅活后作為免疫原，以白油、司班80和硬脂酸鋁作油乳劑，以黃芪浸出液作為免疫增強劑，乳化制備成油乳劑滅活疫苗；其具體步驟如下：
（1）將病原鰻利斯頓氏菌BH1菌株接種在普通營養瓊脂肉湯培養基上，28-30℃搖床培養24h，加入體積終濃度0.3%的甲醛28℃滅活48h，離心得滅活菌體；
（2）取黃芪用蒸餾水浸泡30-60min后煎煮，過濾，濃縮至終濃度為原藥1g/mL，得黃芪浸出液；
（3）將白油加熱至50-55℃，加入硬脂酸鋁，硬脂酸鋁與白油的重量體積比為1-3：100?g?/?ml，繼續加熱至65-70℃，加入司班80，司班80與白油的體積比為5-7：100，直至終溫度115-120℃，維持15-20?min，制得油相，冷卻備用；
（4）將滅活菌體與黃芪浸出液混合，制得疫苗水相；水相中病原鰻利斯頓氏菌BH1免疫原為1011cells/mL，黃芪浸出液為1g/mL，水相中還加入了終體積濃度為4%的吐溫80；
（5）將油相和水相按體積比2:1混合乳化研磨5min，制得黃芪和白油為聯合佐劑的鰻利斯頓氏菌油乳劑滅活疫苗。
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