[發明專利]一種葉酸修飾殼聚糖包裹質粒納米粒子及其制備方法

有效

• 申請號: 201210333201.4
• 申請日: 2012-09-11
• 公開（公告）號: CN102824306A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 盧小玲;趙永祥
• 申請（專利權）人: 廣西醫科大學
• 主分類號: A61K9/10
• 分類號: A61K9/10;A61K9/14;A61K48/00;A61K38/19;A61K47/36;A61P35/00;C08B37/08
• 代理公司: 深圳市順天達專利商標代理有限公司 44217
• 代理人: 郭偉剛;周嬌嬌

1.一種葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將脫乙酰度大于95%的殼聚糖粉末溶解在含1%的醋酸溶液中，制備成5mg/mL的殼聚糖溶液，并調節pH值至4.9-5.2；在持續勻速攪拌作用下，將2mg/mL的三聚磷酸鈉溶液按照1.0:(1.2-2.0)的體積比逐滴滴入所述殼聚糖溶液中，形成物理交聯后的殼聚糖溶液；

S2、在持續勻速攪拌作用下，將5wt%的戊二醛溶液按照1:12-15的體積比逐滴加入到所述物理交聯后的殼聚糖溶液中，37°C水浴震蕩過夜，得到化學交聯后的殼聚糖溶液，并加入過量的NaBH₄粉末；

S3、對步驟S2制得的殼聚糖溶液進行透析純化，得到殼聚糖納米粒子懸浮液；

S4、用磷酸緩沖液將葉酸配成5mg/ml的葉酸溶液；將所述葉酸溶液、殼聚糖納米粒子懸浮液以及1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽按質量比為10:1:5混合，在勻速攪拌作用下，室溫反應30min；透析去除未反應的葉酸，得到葉酸修飾的殼聚糖納米粒子懸浮液；

S5、將IP10質粒用25mmol/L的Na₂SO₄溶液稀釋至1mg/ml后與所述殼聚糖納米粒子懸浮液分別置于55°C水浴5-20min，按質量比為10:1迅速混合后，在渦輪振蕩器上以2000rpm的震蕩速率震蕩30-50秒，室溫下靜置30min；并在4°C下>10,000g離心20min，然后用磷酸緩沖液重懸，形成乳白色懸液，制得葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子。

2.根據權利要求1所述的葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子的制備方法，其特征在于，所述步驟S1中用1mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值至4.9-5.2，所述持續勻速攪拌為500rpm，所述逐滴滴入為1滴/秒的速率。

3.根據權利要求1所述的葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中所述水浴震蕩的震蕩速率為120rpm。

4.根據權利要求1所述的葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中透析純化使用的透析袋的截留分子量為8000-14000，透析時間為2小時。

5.根據權利要求1所述的葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子的制備方法，其特征在于，所述步驟S4中所述勻速攪拌的速度為200rpm；所述透析去除未反應的葉酸使用截留分子量為8000-14000的透析袋。

6.一種葉酸修飾的殼聚糖包裹質粒納米粒子，其特征在于，采用權利要求1-5中任意一項所述的制備方法制得。