[發明專利]一種利用脂肪酰ACP還原酶生物合成脂肪醇的方法

有效

• 申請號: 201210330969.6
• 申請日: 2012-09-07
• 公開（公告）號: CN102827880A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 劉天罡;劉然;付愛思
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12P7/02
• 分類號: C12P7/02;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/53;C12N9/02
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 薛玲

1.一種利用脂肪酰ACP還原酶生物合成脂肪醇的方法，其是將脂肪酰載體蛋白還原酶基因導入宿主細胞體內，并使該基因在該宿主細胞體內表達。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酰載體蛋白還原酶基因編碼如下蛋白：1）SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示氨基酸序列組成的蛋白；或，2）SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示氨基酸插入、取代和/或增加一個或幾個氨基酸組成的與1）所述蛋白具有同等功能的蛋白。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，將脂肪酰載體蛋白還原酶基因克隆于表達載體上，導入相應的宿主體內或插入宿主細胞的基因組內，并誘導表達。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括通過改造宿主細胞脂肪酸合成和降解的代謝途徑或者根據宿主細胞密碼子的偏愛性對脂肪酰載體蛋白還原酶基因進行優化，以提高脂肪醇的產量。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括對轉化脂肪酰載體蛋白還原酶基因異養微生物進行耐受性篩選，獲得優勢菌株，從而提高脂肪醇的產量。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述宿主細胞選自哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞、酵母細胞、真菌細胞、絲狀真菌細胞、細菌細胞和藍細菌細胞。

7.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，改造的宿主細胞代謝途徑是該宿主細胞體內的有關脂肪酸合成和代謝的相關途徑。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，改造的宿主細胞代謝途徑是該宿主細胞體內提高脂肪酸的產量或者降低脂肪酸的產量用以生產脂肪醇的途徑。

9.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，改造的宿主細胞代謝途徑是改變宿主細胞體內脂肪酸代謝途徑中間物用以生產脂肪醇的途徑。

10.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，改造的異養微生物代謝途徑是改變該異養微生物體內脂肪酸代謝途徑衍生物用以生產脂肪醇的途徑。

11.一種異養微生物或異養細胞，其是接受轉脂肪酰載體蛋白還原酶基因的異養微生物或異養細胞。

12.根據權利要求11所述的異養微生物，其特征在于，所述脂肪酰載體蛋白還原酶基因為DPW基因或AAR基因，其編碼如下蛋白：1）SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示氨基酸序列組成的蛋白；或，2）SEQ?ID?No.2或SEQ?ID?No.4所示氨基酸插入、取代和/或增加一個或幾個氨基酸組成的與1）所述蛋白具有同等功能的蛋白。