[發(fā)明專利]焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)FGFR2基因多態(tài)性試劑盒及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210329118.X
• 申請(qǐng)日: 2012-09-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102899404A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹杉;周宏灝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 長(zhǎng)沙正奇專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 43113
• 代理人: 盧宏

1.一種焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)FGFR2基因多態(tài)性試劑盒，其特征在于，包括如下引物：

（1）擴(kuò)增引物：

?????上游引物：5’-GAATAAAACGGCAGATCCCA-3’；

?????下游引物：5’-ACGAGATGTGTTCCCAGAGC-3’；

?????其中，下游引物的5’進(jìn)行生物素標(biāo)記；

（2）測(cè)序引物：5’-GCCACTTAATGAACCTGT-3’。

2.一種應(yīng)用權(quán)利要求1所述的試劑盒檢測(cè)FGFR2基因多態(tài)性的方法，包括如下步驟：

（1）DNA提取；

（2）聚合酶鏈反應(yīng)：

配制50μl?PCR擴(kuò)增體系，包含：10×PCR?buffer?5.0μl，?dNTP?1.5μl，?FGFR2上游引物?0.5μl，?FGFR2下游引物0.5μl，?rTaq0.5μl，水41.0μl，模板1.0μl；循環(huán)程序?yàn)椋?5℃?5min預(yù)變性；依次在95^oC?30S，50^oC?30S，72^oC?30S，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)；72^oC?保持5min，最終保持在4℃，得擴(kuò)增產(chǎn)物；

（3）焦磷酸測(cè)序單鏈樣本純化；

（4）焦磷酸測(cè)序及結(jié)果分析。