[發明專利]焦磷酸測序法檢測TERT基因多態性試劑盒及方法無效
| 申請號： | 201210329093.3 | 申請日： | 2012-09-07 |
| 公開（公告）號： | CN102899403A | 公開（公告）日： | 2013-01-30 |
| 發明（設計）人： | 曹杉;周宏灝 | 申請（專利權）人： | 中南大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113 | 代理人： | 盧宏 |
| 地址： | 410083 湖南*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 磷酸 測序法 檢測 tert 基因 多態性 試劑盒 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種焦磷酸測序法檢測TERT基因多態性試劑盒，其特征在于，包括如下引物：
（1）擴增引物：
?????上游引物：5’-TCTATCTCAGGCATCTTGACACC-3’；
?????下游引物：5’-GGGGAACAAAGGAGGAAAAG-3’；
?????其中，下游引物的5’進行生物素標記；
（2）測序引物：5’-GCGGGGGCAAAGCTA-3’。
2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測TERT基因多態性的方法，包括如下步驟：
（1）DNA提取；
（2）聚合酶鏈反應：
配制50μl?PCR擴增體系，包含：10×PCR?buffer?5.0μl，?dNTP?2.0μl，?TERT上游引物?1.0μl，?TERT下游引物1.0μl，?rTaq0.5μl，水39.5μl，模板1.0μl；循環程序為：95℃?5min預變性；依次在95oC?30S，52oC?30S，72oC?30S，進行40個循環；72oC?保持5min，最終保持在4℃，得擴增產物；
（3）焦磷酸測序單鏈樣本純化；
（4）焦磷酸測序及結果分析。
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