[發明專利]腎炎清片中土大黃主要成分含量的檢測方法

有效

• 申請號: 201210327760.4
• 申請日: 2012-09-06
• 公開（公告）號: CN103675111A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 周桂榮;鄂秀輝;劉艷;張蘭蘭;周水平
• 申請（專利權）人: 天士力制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京君尚知識產權代理事務所(普通合伙) 11200
• 代理人: 余長江

1.一種腎炎清片中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚含量的檢測方法，包括以下步驟：

1）以大黃素、大黃酚、大黃素甲醚為對照品，制成一定含量的大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的溶液，通過高效液相色譜法測定其圖譜，由大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的特征吸收峰峰面積和對照品進樣量繪制標準曲線；

2）將待測腎炎清片研細，加溶劑超聲處理，然后過濾取濾液，制得供試品；

3）在與步驟1）相同的色譜條件下測定步驟2）制得的供試品的高效液相色譜圖譜，并分別計算大黃素、大黃酚和大黃素甲醚相應特征吸收峰的峰面積，根據步驟1）繪制的標準曲線得到待測腎炎清片中大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量。

2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟1）用80-100%甲醇溶解大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品，制成大黃素濃度為6-25μg/ml、大黃酚濃度為6-25μg/ml和大黃素甲醚濃度為4-16μg/ml的對照品溶液，然后上樣進行高效液相色譜。

3.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟2）將腎炎清片研細后加入6-15％鹽酸溶液中，超聲使之溶散，再加入三氯甲烷，加熱回流0.5-2小時，冷卻，分液，取有機相，去除溶劑，殘渣用80-100%甲醇溶解，過濾取濾液，制得供試品。

4.如權利要求3所述的檢測方法，其特征在于，步驟2）取180mg研細的腎炎清片粉末加入10mL?8％鹽酸溶液中，超聲使之溶散，再加三氯甲烷15mL，加熱回流1小時，冷卻后分液，取三氯甲烷層，水相用三氯甲烷提取3次，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑或水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解，微孔濾膜濾過，即得供試品。

5.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟1）和3）中采用的高效液相色譜法是反相色譜法。

6.如權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，步驟1）和3）進行高效液相色譜的色譜條件是：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相是甲醇-(0.02~0.2％)磷酸溶液，體積比為(0.5~19):1；檢測波長為210-320nm。

7.如權利要求6所述的檢測方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱是Agilent?SB-C₁₈柱，柱體積為4.6×250mm，粒度為5μm；流速：0.8-1.5mL/min；柱溫：25-40℃。