[發明專利]一種檢測白血病相關融合基因的引物和探針、及其試劑盒有效
| 申請號： | 201210327547.3 | 申請日： | 2012-09-06 |
| 公開（公告）號： | CN102827937A | 公開（公告）日： | 2012-12-19 |
| 發明（設計）人： | 熊慧;程新建;謝立群;陳嘉錚;包文靜;童光銓;陳偉 | 申請（專利權）人： | 上海源奇生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201400 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 白血病 相關 融合 基因 引物 探針 及其 試劑盒 | ||
1.一種檢測白血病相關融合基因的引物和探針，其中，所述引物和探針的核苷酸序列為：
(1)用于檢測BCR-ABL融合基因的引物和探針為由SEQ?ID?NO：1所示的上游引物F1，由SEQ?ID?NO：2所示的上游引物F2，由SEQ?ID?NO：3所示的上游引物F3，由SEQ?ID?NO：4所示的下游引物，由SEQ?ID?NO：5所示的探針，其中SEQ?ID?NO：5所示的核苷酸序列的5’端有Fam標記，3’端有Tamara標記；
(2)用于檢測PML-RARa融合基因的引物和探針為：由SEQ?ID?NO：6所示的上游引物F1，由SEQ?ID?NO：7所示的上游引物F2，由SEQ?ID?NO：8所示的上游引物F3，由SEQ?ID?NO：9所示的下游引物，由SEQ?ID?NO：10所示的探針，其中SEQ?ID?NO：10所示的核苷酸序列的5’端有Fam標記，3’端有Tamara標記；
(3)用于檢測AML1-ETO融合基因的引物和探針為：由SEQ?ID?NO：11所示的上游引物F1，由SEQ?ID?NO：12所示的下游引物，由SEQ?ID?NO：13所示的探針，其中SEQ?ID?NO：13所示的核苷酸序列的5’端有Fam標記，3’端有Tamara標記。
2.一種含有權利要求1所述檢測白血病相關融合基因的引物和探針的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒的組成為：所述的試劑盒包括核酸擴增試劑、對照品和參考品，其中，所述的核酸擴增試劑包括：
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，
檢測BCR-ABL融合基因的RT-PCR反應液1中含有：5×Buffer液5μl，10mmol/L的dNTPs各0.25μl，50μmol/L的SEQ?ID?NO：1～SEQ?ID?NO：5各0.12μl，50μmol/L?SEQ?ID?NO：50.1μl，用工藝用水補足至8μl；
檢測PML-RARa融合基因的RT-PCR反應液2中含有：5×Buffer液5μl，10mmol/L的dNTPs各0.25μl，50μmol/L的SEQ?ID?NO：6～SEQ?ID?NO：10各0.12μl，50μmol/L?SEQ?ID?NO：100.1μl，用工藝用水補足至8μl；
用于檢測AML1-ETO融合基因的引物和探針為中含有：5×Buffer液5μl，10mmol/L的dNTPs各0.25μl，50μmol/L的SEQ?ID?NO：11～SEQ?ID?NO：12各0.12μl，50μmol/L?SEQ?ID?NO：130.1μl，用工藝用水補足至8μl；
RT內參PCR反應液中含有：5×Buffer液5μl，10mmol/L的dNTPs各0.25μl，50μmol/L的SEQ?ID?NO：14～SEQ?ID?NO：16各0.12μl，50μmol/L?SEQ?ID?NO：160.1μl，用工藝用水補足至8μl；
參考品PCR反應液中含有：5×Buffer液5μl，10mmol/L的dNTPs各0.25μl，50μmol/L的SEQ?ID?NO：17～SEQ?ID?NO：18各0.12μl，50μmol/L?SEQ?ID?NO：160.1μl，用工藝用水補足至8μl。
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