[發明專利]AV/BV聯合檢測試劑盒的質控品及其制備方法

有效

• 申請號: 201210319858.5
• 申請日: 2012-08-31
• 公開（公告）號: CN102864208A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 王加義;張麗梅
• 申請（專利權）人: 北京中生金域診斷技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/44
• 分類號: C12Q1/44;C12Q1/37;C12Q1/34;C12Q1/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術領域

本發明屬于生物制品技術領域，具體地說，涉及AV/BV聯合檢測試劑盒的質控品及其制備方法。

背景技術

近年來研究發現，女性細菌性陰道感染可分為兩種，一種是由厭氧菌和兼性厭氧菌引起的，其主要預成酶為唾液酸苷酶；另一種是由需氧菌引起的，主要預成酶為β-葡萄糖醛酸苷酶和凝固酶，同時臨床上用白細胞酯酶來評價女性陰道是否存在炎癥，根據過氧化氫濃度來判定陰道微生態環境。應用相關試劑盒（如ZL200910244266.X）可以診斷女性是否感染需氧菌陰道炎和細菌性陰道炎，該項技術被廣泛應用于婦科診斷中。

試劑盒的質量檢測關系到病人的明確診斷和病情監測，在有關女性陰道炎的篩查中，由于陰道分泌物成分特殊，個體差異較大，很難用其檢測后的標本作為制備質控品的基質，且白細胞酯酶、β-葡萄糖醛酸苷酶穩定性極差，非常容易失活，液體質控品在-20℃能保存較長時間，而4℃只能保存3天。

目前，市場上有關女性陰道炎檢測的試劑盒種類繁多，但是未見其提供配套試劑盒的質控品，由于陰道分泌物成分特殊，個體差異較大，混合正常分泌物來源之一是醫學檢驗日常工作中剩余的標本，由于每個剩余標本量僅幾百微升甚至更少，不適合商品化生產要求數千毫升以上的用量，同時對每個標本進行致病病原體的檢測成本很高。因此，亟待開發出安全、有效的用于女性陰道炎檢測試劑盒質量檢測的質控品。

發明內容

本發明的目的是提供一種AV/BV聯合檢測試劑盒的質控品及其制備方法。

為了實現本發明目的，本發明的一種AV/BV聯合檢測試劑盒的質控品,包括陰性質控品和陽性質控品；

陰性質控品的成分為：模擬陰道分泌物成分的基質I+過氧化氫2～5μmol/L+唾液酸苷酶0～5U/L+白細胞酯酶0～6U/L+β-葡萄糖醛酸苷酶0～10U/L+蛋白酶（催化作用相當于凝固酶）0～12U/L，pH3.0～4.0；

陽性質控品的成分為：模擬陰道分泌物成分的基質II+過氧化氫0～1.5μmol/L+唾液酸苷酶7～12U/L+白細胞酯酶9～15U/L+β-葡萄糖醛酸苷酶15～24U/L+蛋白酶（催化作用相當于凝固酶）20～30U/L，pH5.0～6.0；

其中，陰性質控品和陽性質控品經冷凍干燥后呈干粉狀；且可以做成試劑盒的形式。

模擬陰道分泌物成分的基質I配方為：

優選地，模擬陰道分泌物成分的基質I配方為：

模擬陰道分泌物成分的基質II配方為：

優選地，模擬陰道分泌物成分的基質II配方為：

前述的AV/BV聯合檢測試劑盒，其包括：

1）反應裝置

所述反應裝置具有過氧化氫反應孔、唾液酸苷酶反應孔、白細胞酯酶反應孔、β-葡萄糖醛酸苷酶反應孔和凝固酶反應孔；

2）一種或多種顯色劑；

3）樣品稀釋液；

其中，所述反應裝置的過氧化氫反應孔包被有辣根過氧化物酶和二乙氨基對苯二胺；

所述反應裝置的唾液酸苷酶反應孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神經氨酸鹽，其對應的顯色劑A為固紫B或固紅TR；

所述反應裝置的白細胞酯酶反應孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸鹽；

所述反應裝置的β-葡萄糖醛酸苷酶反應孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸鹽；

所述反應裝置的凝固酶反應孔包被有甘氨酰精氨酸β萘胺，其對應的顯色劑B為固藍B、固紅B、固藍BB或固藍RR；

所述樣品稀釋液中含有Triton×100和樹膠。

本發明還提供前述AV/BV聯合檢測試劑盒的質控品的制備方法，包括以下步驟：

1）質控品溶液的配制：按照上述各成分配方，分別配制陰性質控品溶液和陽性質控品溶液；采用常規的化學配制方法，在常溫下溶解配制，配制得到的陰性質控品溶液應為澄清透明液體，陽性質控品溶液應為乳白色渾濁液體。

2）真空干燥：將上述質控品溶液分裝后置于-40℃2h，然后抽真空，調溫至-10℃維持10h，升溫至0℃維持5h，升溫至25℃維持10h，即得。