[發(fā)明專利]一種富集水產(chǎn)品中天然四環(huán)素類抗生素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210315887.4
• 申請日: 2012-08-31
• 公開（公告）號: CN103076415A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許恒毅;熊勇華;梁語嫣;羅薇;郭亮;徐峰;賴衛(wèi)華
• 申請（專利權(quán)）人: 南昌大學(xué)
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;B01J20/285;B01J20/30
• 代理公司: 南昌新天下專利商標(biāo)代理有限公司 36115
• 代理人: 施秀瑾

1.一種富集水產(chǎn)品中天然四環(huán)素類抗生素的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）在水產(chǎn)品肌肉組織中加入適量0.1?mol/L?pH4.0的乙二胺四乙酸鈉/Mcllvaine緩沖液，樣品經(jīng)勻漿后，離心至明顯分層，取上清；

抽提上清液調(diào)整pH至5.0-6.0，溶液中加入一定量苯酚或者苯甲酸功能團(tuán)修飾的聚苯乙烯磁球，充分混勻吸附3-5分鐘，磁力架分離磁球，棄去上清；

（2）1-5%甲醇水溶液洗滌磁球2-3次；

（3）加適量內(nèi)含20%乙腈以及10%的甲醇的0.01?mol/L草酸溶液至吸附有四環(huán)素類抗生素的磁球中，分離磁球，收集洗脫液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富集方法，其特征在于每1?g水產(chǎn)品肌肉組織所需磁球劑量為2-10?mg。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富集方法，其特征在于每1?mg吸附有四環(huán)素類抗生素的磁球中加入的洗脫液體積為40-80?μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富集方法，其特征在于所述表面修飾了一定密度苯酚或者苯甲酸功能團(tuán)的聚苯乙烯磁球，磁球粒徑為70-300?nm之間。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富集方法在分析檢測水產(chǎn)品中天然四環(huán)素類抗生素中的應(yīng)用，其特征在于收集洗脫液，過濾，直接上高效液相色譜或液質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行定量定性分析。

6.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一所述的富集水產(chǎn)品中四環(huán)素類抗生素的方法，其特征在于所述苯酚或苯甲酸功能團(tuán)修飾的磁球按照如下步驟制備：

化學(xué)共沉淀法合成超順磁性Fe₃O₄納米單顆粒，再將Fe₃O₄納米顆粒表面油酸化，無水乙醇洗滌后氮?dú)獯蹈桑蝗??g表面油酸化的Fe₃O₄納米顆粒，用體積比15:1的苯乙烯-十六烷混合液5?mL懸浮Fe₃O₄納米顆粒，超聲5~10?min形成磁流體，將磁流體轉(zhuǎn)入400?mL，0.01M含0.2~0.5%的SDS的NaHCO₃溶液中，超聲波頻率為25KHz?，超聲功率為200-300?W條件下功率繼續(xù)超聲乳化30min，形成細(xì)乳液；細(xì)乳液中加0.1g?K₂S₂O₈于70℃反應(yīng)10~20?min后，然后加入0.5?g對乙烯基苯酚或?qū)σ蚁┗郊姿幔^續(xù)反應(yīng)12~16?h；磁架吸附磁球，即獲得內(nèi)含超多個(gè)順磁性Fe₃O₄納米顆粒的苯酚或苯甲酸功能團(tuán)修飾的磁球；磁架回收磁球，制備好的苯酚或苯甲酸功能團(tuán)修飾的磁球依次采用飽和食鹽水、3%?NaOH?以及3%?HCl?浸泡洗滌各1~3?h，，最后以0.01?mol/L?pH?7.0磷酸鹽緩沖液洗滌磁球至中性，并將磁球重懸于0.01?mol/L?pH?7.0?磷酸鹽緩沖液中于4?℃保存?zhèn)溆谩?/p>