[發明專利]一種視黃醇檢測試劑盒及其制備方法無效
| 申請號: | 201210312846.X | 申請日: | 2012-08-30 |
| 公開(公告)號: | CN102841210A | 公開(公告)日: | 2012-12-26 |
| 發明(設計)人: | 謝兵 | 申請(專利權)人: | 謝兵 |
| 主分類號: | G01N33/68 | 分類號: | G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100083 北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 視黃醇 檢測 試劑盒 及其 制備 方法 | ||
1.一種視黃醇結合蛋白檢測試劑盒,其組成為:試劑R1、試劑R2,
其中:
a、試劑R1包括:200-220mmol/L?Tris緩沖液、5-10?mmol/L聚乙二醇、1-5?mmol/L疊氮鈉、1-5mmol/L乙二胺四乙酸鈉、1-5mmol/L牛血清白蛋白;
b、試劑R2:200-220mmol/L?Tris緩沖液、結合有視黃醇結合蛋白單克隆抗體的乳膠粒子、1-5mmol/L吐溫-20、0.5-3?mmol/L疊氮鈉、1-5mmol/L乙二胺四乙酸鈉、1-5mmol/L牛血清白蛋白。
2.權利要求1的試劑盒,其特征在于:試劑R2中的視黃醇結合蛋白單克隆抗體的乳膠粒子的制備方法為:?10.5mg/ml的視黃醇結合蛋白單克隆抗體與10%的乳膠顆粒(直徑50-100nm),加入到200-220mmol/L?Tris緩沖液中,震蕩反應4小時,
離心去上清,再用200-220mmol/L?Tris緩沖液稀釋至0.5%,并加入0.1-0.3?mmol/L疊氮鈉。
3.上述試劑盒的制備和操作方法,主要步驟為:
(a)按下列比例配制好試劑:
試劑R1:
Tris緩沖液??????200-220mmol/L
聚乙二醇????????5-10?mmol/L
疊氮鈉??????????1-5?mmol/L
乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L
牛血清白蛋白????1-5mmol/L;
試劑R2:
Tris緩沖液??????200-220mmol/L
結合有視黃醇結合蛋白單克隆抗體的乳膠粒子???3.5-5%(v/v)
吐溫-20?????????1-5mmol/L
疊氮鈉??????????0.5-3?mmol/L
乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L
牛血清白蛋白????1-5mmol/L;
(b)將試劑與待測樣本按一定比例混合,使其完全反應;
(c)用半/全自動生化分析儀測定吸光度變化值;
(d)根據吸光度變化值計算出樣本中視黃醇結合蛋白的濃度。
4.權利要求3的方法,其特征在于,被測樣品與試劑比例應控制在1:?20到1:30之間。
5.權利要求3的方法,其特征在于,反應溫度為37(±1)℃。
6.權利要求3的方法,其特征在于,反應時間為8-12分鐘。
7.權利要求3的方法,其特征在于,用半/全自動生化分析儀檢測的波長為340nm。
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