[發(fā)明專利]一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210312186.5
• 申請(qǐng)日: 2012-08-29
• 公開（公告）號(hào): CN102793927A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳紅云;徐進(jìn);范金紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鄭州后羿制藥有限公司
• 主分類號(hào): A61K47/42
• 分類號(hào): A61K47/42;A61K9/19;A61K39/187;A61P31/14
• 代理公司: 鄭州睿信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種病毒活疫苗的保護(hù)劑，具體涉及一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑及其制備方法和應(yīng)用，屬動(dòng)物用病毒活疫苗制造領(lǐng)域。

背景技術(shù)

豬瘟是由豬瘟病毒（Classical?Swine?Fever?Virus,CSFV）引起的一種高度接觸性傳染病，具有流行廣泛、發(fā)病率高等特點(diǎn)，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。豬瘟病毒是黃病毒科（Flaviviridae）瘟病毒屬（Pestivirus）的成員，為有囊膜的正鏈RNA病毒。

預(yù)防豬瘟最有效的方法就是接種豬瘟疫苗。目前市場(chǎng)上預(yù)防豬瘟的疫苗主要有三種：乳兔苗、細(xì)胞苗和淋脾苗。然而，疫苗在運(yùn)輸過程中需要冷藏保存，冷藏條件為-15℃，在我國(guó)一些經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)，運(yùn)輸條件很難要求，由此造成的疫苗失活、免疫失敗以致疫病爆發(fā)，為我國(guó)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

凍干保護(hù)劑及其制備方法是活疫苗生產(chǎn)工藝中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，對(duì)疫苗的保存、運(yùn)輸和使用均產(chǎn)生影響。目前國(guó)內(nèi)常用的保護(hù)劑主要由牛奶、蔗糖、明膠等組成，組方簡(jiǎn)單，保護(hù)功能差，而國(guó)外對(duì)疫苗保護(hù)劑的研究技術(shù)較為保密，因此，使得我國(guó)成品疫苗的長(zhǎng)期保存和運(yùn)輸受到了較大的限制。

影響凍干保護(hù)劑保護(hù)性能的因素主要來(lái)自兩方面：一是微生物因素，微生物的種類和結(jié)構(gòu)差異（如病毒有無(wú)囊膜）、培養(yǎng)方法的選擇以及疫苗的種類等；二是保護(hù)劑的配方，選用保護(hù)劑的原料及其性質(zhì)、原料配比及與該疫苗適應(yīng)的凍干曲線等。在選擇凍干保護(hù)劑的組方時(shí)，要考慮上述幾種主要因素，選擇合適的組方與搭配，并通過反復(fù)驗(yàn)證制定凍干曲線。

豬瘟病毒對(duì)熱、酸敏感，在存放和運(yùn)輸過程中容易受到環(huán)境中溫度和酸堿度的影響，因此，需要選擇一種合適的病毒保護(hù)劑，能夠在不同保存條件下有效的防止病毒遭受破壞，保持病毒滴度，以延長(zhǎng)病毒的存放期。耐熱凍干保護(hù)與常規(guī)凍干保護(hù)劑又有不同，它較多得考慮了生物活性制品在高溫、長(zhǎng)時(shí)間保存條件下凍干物質(zhì)理化性質(zhì)的改變對(duì)活疫苗存活的影響。因此，研制一種配方簡(jiǎn)單、適于大規(guī)模生產(chǎn)、保護(hù)功能強(qiáng)的豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的制備方法。

同時(shí)，本發(fā)明還提供一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑，由以下重量百分含量的組分組成：海藻糖5～10%，聚乙烯吡咯烷酮（PVP）2～3%，明膠1～2%，谷氨酸鈉1～3%，D-山梨醇2～5%，多聚蛋白胨4～5%，L-精氨酸0.5～1%，維生素C?0.5～1%，余量為滅菌后的注射用水。

一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑的制備方法，具體步驟如下：

（1）按所述重量配比稱取聚乙烯吡咯烷酮、明膠、D-山梨醇、多聚蛋白胨溶于少量注射用水中，滅菌后備用；

（2）按所述重量配比稱取海藻糖、谷氨酸鈉、L-精氨酸、維生素C溶于少量注射用水中，過濾除菌后備用；

（3）將步驟（1）、（2）制得的溶液混合，加注射用水至全量即得。

一種豬瘟活疫苗耐熱凍干保護(hù)劑在制備豬瘟活疫苗方面的應(yīng)用，包括：將本發(fā)明耐熱凍干保護(hù)劑與豬瘟病毒抗原液以1:（0.8～1.2）的體積比混合，加入抗生素，分裝，冷凍干燥。

所述的抗生素為氨芐青霉素、硫酸鏈霉素中的一種。

所述的氨芐青霉素的加入量為每毫升10000～20000U。

所述的硫酸鏈霉素的加入量為每毫升10～20mg。

所述冷凍干燥的具體步驟為：將混合液置入0℃～4℃的凍干箱中，以1℃～2℃/min的降溫速率降至-30℃～-40℃，在此溫度下維持3～4h，開啟真空泵，至箱內(nèi)真空度達(dá)0.01mber時(shí)開始升溫，在16～24h范圍內(nèi)升至-8℃～-4℃，再以5℃～8℃/h的升溫速率升至20℃～25℃，在此溫度下維持3～6h。

本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明的耐熱凍干保護(hù)劑配方簡(jiǎn)單，制備容易，適于大規(guī)模生產(chǎn)，對(duì)疫苗具有良好的保護(hù)功效。制備得到的疫苗無(wú)菌安全、且性狀穩(wěn)定，具有耐熱、保存時(shí)間長(zhǎng)的特點(diǎn)，解決了疫苗在運(yùn)輸過程中需要低溫冷凍、貯存不方便等問題。本發(fā)明的耐熱凍干保護(hù)劑可以使豬瘟活疫苗在2℃～8℃條件下保存30個(gè)月以上。

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例僅對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。

實(shí)施例1