[發(fā)明專利]CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物及制備工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210311219.4
• 申請日: 2012-08-29
• 公開（公告）號: CN103073642A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設計）人: 王雷;李一凡
• 申請（專利權）人: 深圳伯美生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K17/08;G01N33/68
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識產(chǎn)權事務所(普通合伙) 44248
• 代理人: 胡吉科

1.一種C反應蛋白（CRP）抗體，其特征是：所述CRP抗體為人血清純化天然CRP作為免疫原，制備而得的互補配對單克隆抗體或多克隆抗體。

2.如權利要求1所述的CRP抗體，其特征是：所述的單克隆抗體雜交瘤細胞株為7C1和5D1。

3.一種CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述納米乳膠微球組合物為權利要求1或者2所述的單克隆抗體，分別與合適粒徑大小的羧基化聚苯乙烯微球在緩沖液中混合，在活化劑的作用下，聚苯乙烯微球上的羧基與抗體上的氨基縮合形成偶聯(lián)物。

4.如權利要求3所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述CRP單克隆抗體是用人血清中C反應蛋白天然抗原免疫小鼠，篩選多個親和力不同的細胞株，優(yōu)選互補配對的具有不同抗原識別表位的抗體亞型，其親和力在1×10^6?-?1×10^8?M^-1之間或以上。

5.如權利要求3所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：C反應蛋白單克隆抗體的不同種亞型，分別偶聯(lián)不同直徑的聚苯乙烯微球，或者以混合偶聯(lián)同一種直徑的聚苯乙烯微球。

6.如權利要求3-5任一項所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述的羧基化聚苯乙烯微球直徑范圍在50-500nm。

7.如權利要求3-5任一項所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述每毫克聚苯乙烯微球交聯(lián)抗體的量是0.03-1毫克。

8.如權利要求3-5任一項所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述緩沖液選用磷酸鹽緩沖液、檸檬酸-磷酸鹽緩沖液、2-嗎啉乙磺酸緩沖液、三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液、羥乙基哌嗪乙硫磺酸緩沖液、氯化銨緩沖液及甘氨酸緩沖液中的一種或幾種。

9.如權利要求7所述的CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物，其特征是：所述緩沖液包括添加物：所述的添加物為蛋白穩(wěn)定劑、表面活性劑、防腐劑和/或小牛血清蛋白中的一種或幾種。

10.一種制備CRP單克隆抗體納米乳膠微球組合物的方法，包括步驟：

A）純化人血清CRP抗原；

B）單克隆抗體制備和鑒定；

C）單克隆抗體與聚苯乙烯微球偶聯(lián)，抗體乳膠微球偶聯(lián)物混合形成組合物；

D）抗體乳膠微球組合物應用于免疫透射比濁和免疫散射比濁檢測人血清CRP濃度。