[發(fā)明專利]一種基因C型鴨甲型肝炎病毒定性和定量檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210302441.8
• 申請日: 2012-08-23
• 公開（公告）號: CN102827951A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 湯承;岳華;黃秋雪
• 申請（專利權(quán)）人: 西南民族大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 成都信博專利代理有限責(zé)任公司 51200
• 代理人: 張澎

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及家禽傳染病診斷，具體涉及基因C型鴨甲型肝炎病毒熒光定量RT-PCR方法技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

近年來，由基因C型鴨甲型肝炎病毒(DHAV-C)引起的鴨病毒性肝炎廣泛流行于韓國和中國，該病毒主要侵害3周齡內(nèi)雛鴨，發(fā)病急，病死率高，嚴(yán)重影響?zhàn)B鴨業(yè)的發(fā)展。DHAV-C引起的鴨病毒性肝炎與基因A型鴨甲型肝炎病毒(DHAV-A)引起的鴨肝炎在流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化等非常相似，只有借助實驗室診斷才能鑒別，病毒分離鑒定是傳染病病原學(xué)診斷的經(jīng)典方法，但該方法至少需要1～2周才能確診，費時費力，不能滿臨床實踐中對傳染病及早診斷、迅速采取有效措施進行防治的的需求。RT-PCR作為一種常規(guī)的分子生物學(xué)技術(shù)以其快速、靈敏、特異、操作簡單等優(yōu)點廣泛用于人類和多種動物病毒病的診斷([1]Pritchard?L?I，Morrissy?C，Van?Phuc?K，et?al.Development?of?a?polymerase?chain?reaction?to?detect?Vietnamese?isolates?of?duck?virus?enteritis.[J].Vet?Microbiol，1999，68(1-2)：149-156.[2]Keramas?G，Bang?D?D，Lund?M，et?al.Use?of?culture，PCR?analysis，and?DNA?microarrays?for?detection?of?Campylobacter?jejuni?and?Campylobacter?coli?from?chicken?feces.[J].J?Clin?Microbiol，2004，42(9)：3985-3991.[3]Lund?M，Nordentoft?S，Pedersen?K，et?al.Detection?of?

Campylobacter?spp.in?chicken?fecal?samples?by?real-time?PCR.[J].J?Clin?Microbiol，2004，42(11)：5125-5132.[4]Identifcation?of?duck?plague?virus?by?polymerase?chain?reaction.[J].1999，43(1)：106-115.)。目前已有RT-PCR用于DHAV-C鴨肝炎的診斷韓國學(xué)者Kim等(Kim?MC，Kwon?YK，Joh?SJ，et?al.Differential?diagnosis?between?type-specifc?duck?hepatitis?virus?type?1(DHV-1)and?recent?Korean?DHV-1-like?isolates?using?a?multiplex?polymerase?chain?reaction.[J].Avian?Pathology，2008,37(2)：171-177.)分別針對DHAV-A基因組的DRL-62基因和DHAV-C基因組的AP-04203基因設(shè)計了兩對引物(AP1：

5’-GTTCCAAATGATGATTATTATG-3’；AP2：