[發明專利]一種基因C型鴨甲型肝炎病毒定性和定量檢測方法

無效

• 申請號: 201210302441.8
• 申請日: 2012-08-23
• 公開（公告）號: CN102827951A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 湯承;岳華;黃秋雪
• 申請（專利權）人: 西南民族大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 成都信博專利代理有限責任公司 51200
• 代理人: 張澎

1.一種基因C型鴨甲型肝炎病毒定性和定量檢測方法，采用一對特異性引物，包括：上游引物DHAV-C?FP、下游引物DHAV-C?RP；以cDNA為模板，擴增194bp的目的片段，進行熒光定量PCR檢測，所述檢測的最佳反應體系為20μL，包括：SYBR?Green?I?master?mix?10μL；上下游引物各0.4μL；DNA模板2μL，補充去離子水至20μL；反應條件為95℃預變性3min；95℃變性15s；60℃退火31s，進行30個循環，得到Ct值，即可實現對被檢測樣本的定性檢測；由預先測定的熒光定量標準曲線方程可獲得所檢測基因C型鴨甲型肝炎病毒拷貝數，實現對被檢樣本進行定量。

2.根據權利要求1所述一種基因C型鴨甲型肝炎病毒定性和定量檢測方法，其特征在于：所述上游引物DHAV-C?FP序列為：TCCAACAGGGTCAAAGC，所述下游引物DHAV-C?RP序列為：AACTACTACAAGTCTGCCACG，擴增位于DHAV-C?2C基因4639～4832位點的片段。

3.根據權利要求1所述之一種基因C型鴨甲型肝炎病毒定性和定量檢測方法，其特征在于，所述熒光定量標準曲線方程為：Y=-3.348X+26.310，X為所測病毒拷貝數，Y為Ct值。