[發明專利]微擬球藻培養基配方及三級培養方法

在審

• 申請號: 201210298905.2
• 申請日: 2012-08-22
• 公開（公告）號: CN102851211A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 王培磊
• 申請（專利權）人: 王培磊
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種微擬球藻培養基，其特征在于該微擬球藻培養基配方如下：NaNO₃?7.5×10^-2g，KH₂PO₄?1×10^-2g，NaHCO₃?5×10^-1g，檸檬酸鐵(FeC₆H₅O₇.5H₂O)2×10^-4g，VB₁₂?5×10^-7g，VB₁?1×10^-4g，VH?5×10^-7g，九二0植物生長刺激素(赤霉素)5國際單位，人尿2mL，消毒海水1000mL。

2.如權利要求1所述的微擬球藻培養基，其特征在于還包括微量元素0.55～2.25ml/L，所述微量元素配方為：磷酸二氫鈉32～40g/L、硫酸銅1.2～3.2g/L、硫酸鋅4.2～6.2g/L、氯化鈷4～6g/L、氯化錳30～45g/L加水定容至1L。

3.如權利要求2所述的微擬球藻培養基，其特征在于所述微量元素溶液中加入120～140g/L的磷酸二氫鈉溶液。

4.如權利要求2所述的微擬球藻培養基，其特征在于所述微量元素溶液中加入乙二胺四乙酸二鈉3～10g/L。

5.如權利要求1所述的微擬球藻培養基的三級培養方法，其特征在于包括如下步驟：

1)一級培養容器為5000mL三角燒瓶，燒瓶用洗液洗滌、晾干、120℃恒溫消毒；培養用的海水比重1.015～1.018，鹽度30～32，經過經脫脂棉過濾、煮沸、冷卻后加入營養鹽；室內培養，室溫20-26℃，室內自然光+輔助日光燈管光源照射，光強3000-10000Lx，光暗周期＝14L:10D，指數增長期藻種接種，接種密度300-350×10⁴cell/mL，不充氣。培養期間每天搖動6次，密度達3000×10⁴cell/mL，即轉入二級培養。

2)二級培養容器為50L白塑料桶，白塑料桶刷干凈、漂白粉消毒后用消毒水沖干凈備用。二級培養用的海水經漂白粉消毒、硫代硫酸鈉處理后加入營養鹽；將一級培養的藻液按1∶10的比例接種到白桶。室內培養，室溫20-26℃，室內自然光+輔助日光燈管光源照射，光強3000-10000Lx，光暗周期＝14L:10D，充氣培養，充氣量以能將藻細胞沖起懸浮即可。

3)三級培養容器為水泥池。面積20-30m²，池深50cm，水深20-30cm，內貼白色瓷磚，三級培養用水經漂白粉消毒、硫代硫酸鈉處理。將二級培養的藻液作藻種轉入水泥池培養，室外培養，自然光照射，充氣，接種密度200-300×10⁴cell/mL，培養至密度達2000-3000×10⁴cell/mL即可收獲。

6.如權利要求5所述的微擬球藻培養基的三級培養方法，其特征在于包括在步驟2)中充氣培養時同時施加臭氧。

7.如權利要求5-6所述的微擬球藻培養基的三級培養方法，其特征在于臭氧的濃度為0.5微克/升空氣～0.8微克/升空氣。