[發明專利]一種卡特蘭組織培養的方法

無效

• 申請號: 201210287484.3
• 申請日: 2012-08-14
• 公開（公告）號: CN102835311A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 邵和平;張瓊;張寧寧;孫永平;夏明霞
• 申請（專利權）人: 江蘇丘陵地區南京農業科學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.卡特蘭的組織培養方法，其特征在于，

（1）?外植體的選擇與滅菌

選6~8厘米長的新梢作材料，用升汞消毒法進行消毒，切取頂芽和側芽生長點中心部位的分生組織塊作外植體進行培養；

（2）愈傷組織誘導培養

將外植體分生組織塊放置在誘導培養基中，卡特蘭莖尖增殖的誘導培養基為：改良的MS?+?6-BA3～10mg/L?+?NAA0.5～3mg/L?+?糖20000～30000mg/L，培養條件為液體震蕩暗培養，溫度20～25℃，液體培養皿放置在回旋器上，回旋頻率120rpm，培養40-60天；

其中，改良的MS基本培養基為，單位：mg/L：NH4NO3：850～1850、KNO3：1000～1900、CaCl2·2H2O：250～650、MgSO4·7H2O：200～400、KH2PO4：50～200、KI：0.4～0.9、H3BO3：3.0～7.0、MnSO4·4H2O：12.0～25.0、ZnSO4·7H2O：2.5～9.5、Na2MoO4·2H2O：0.16～0.35、CuSO4·5H2O：0.016～0.025、CoCl2·6H2O：0.016～0.025、FeSO4·7H2O：20.0～30.0、Na2·EDTA·2H2O：18.0～40.0、肌醇：50~100、氨基乙酸：2.0~3.0、谷氨酸：10~18、天冬酰胺酸：10~18；

（3）繼代培養

把增殖的愈傷組織轉接到繼代培養基，培養基配方為：改良的KC?+?瓊脂6000～8000mg/L?+?糖20000～30000mg/L，培養條件為：溫度20～28℃，光強1500～3000Lx，每天光照?12~16小時，每30天轉接1次，愈傷組織上逐漸分化出原球莖，原球莖進一步發育成幼苗；

其中，改良的KC基本培養基為，單位：mg/L：Ca(NO3)2·4H2O：500~1000、KH2PO4：200~400、MgSO4·7H2O：100～300、(NH4)2SO4：400～1000、NH4NO3：350～850、FeSO4·7H2O：10～50、KCl：200~400、MnSO4·4H2O：3.0～10.0；

（4)?生根培養

將3～4cm高的苗接入生根培養基中，培養基配方為：改良的KC?+?NAA0.2~2mg/L?+?瓊脂6000～8000mg/L?+?糖20000～30000mg/L，培養條件為：光照培養，溫度為20～28℃，光強1500～3000Lx，每天光照16小時。

2.根據權利要求1所述卡特蘭的組織培養方法，其特征在于，切割頂芽和側芽生長點中心部位的分生組織塊大小為直徑2~4mm。