[發明專利]一種登革病毒/黃熱病毒/西尼羅病毒/基孔肯雅病毒鑒別檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201210282195.4
• 申請日: 2012-08-09
• 公開（公告）號: CN102776297A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 李明;鄭夔;高秀潔;陳華云;丁國允;黃吉城;李小波;師永霞
• 申請（專利權）人: 中山大學達安基因股份有限公司;廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
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技術領域

本發明涉及一種四種蟲媒性傳播病原體鑒別檢測的試劑盒，特別是涉及一種利用多重實時熒光聚合酶鏈式反應技術檢測登革病毒、黃熱病毒、西尼羅病毒、基孔肯雅病毒的試劑盒。本試劑盒主要包括RT-PCR反應液、引物探針混合液、RT-PCR反應酶系、DEPC?H₂O，以及分隔并集中包裝這些試劑瓶或管的包裝盒。由于本試劑盒能準確區分登革病毒、黃熱病毒、西尼羅病毒以及基孔肯雅病毒，可廣泛應用于由上述蟲媒傳播病毒所引起的的鑒別診斷、檢驗檢疫、疫情防控等多個領域。

背景技術

蟲媒病毒(Arbovirus)是指由吸血昆蟲傳播的病毒，其特點是病毒可在昆蟲體內繁殖，但昆蟲本身不發病，通過叮咬將病毒傳播給人、畜，因此蟲媒病毒可以引起人畜共患病。國際上已發現537種蟲媒病毒，其中130余種可引起人畜疾病，導致發熱、皮疹和關節痛、出血熱、休克等，嚴重的可以引起死亡。此外30種蟲媒病毒可引起腦炎。蟲媒病毒分布世界各地，并可因人群的流動、宿主和媒介的遷移而傳播到異地。登革熱(Dengue?fever)、黃熱(Yellow?fever?virus)、西尼羅熱(West?Nile?fever)和基孔肯雅熱(Chikungunya?fever)四種疾病是威脅著熱帶或亞熱帶國家人民健康的重要蟲媒病毒性傳染病，分別因感染登革熱病毒(Dengue?virus，DV)、黃熱病毒(Yellow?fever?virus，YFV)、西尼羅病毒(West?Nile?virus，WNV)和基孔肯雅病毒(Chikungunya?virus，CHIK)所引起。我國廣東、廣西、貴州、海南、云南等地處亞熱帶氣候，有多種蟲媒病毒存在和傳播的條件，自1978年在廣東佛山發生登革熱流行以來，廣東省每年都有可能由輸入性病例引起的登革熱后續感染流行的疫情報告，黃熱每年都有發生，而西尼羅熱和基孔肯雅熱極有可能存在輸入的可能并造成流行。由于登革熱、西尼羅熱和基孔肯雅熱在臨床癥狀上非常相似，而診斷鑒別對分離培養條件要求較高，因此不排除已存在輸入性西尼羅熱或基孔肯雅熱病例；另外，海南、云南二省已經發現過基孔肯雅病毒并從人群中檢出過相應的抗體。

登革、黃熱、西尼羅和基孔肯雅等四種病毒中，除黃熱病毒在我國南方區域廣泛存在外，其余三種病毒，特別是登革病毒，需嚴防入境人員或蚊蟲帶入；即使已經傳入，各地醫療、疾控部門也必需盡早發現，以把疫情控制在最小范圍。WHO統計的數字顯示，全球每年感染登革病毒的人數高達5000萬人，特別在我們毗鄰的東南亞各國，一年四季都有登革熱流行，對人民的身體健康造成極大的危害；西尼羅熱是起源和流行于非洲的蟲媒傳染病，在二十世紀末，作為一種再發的傳染病(Emerging?Infectious?Disease)傳到北美洲后，給美國和加拿大等北美各國帶來了重大經濟損失和極大的恐慌，單在美國2002年就報告4156例，死亡284例，隨后疫情擴散到44個州，2003年又報告9306病例，死亡240例；而近幾年中，在我國周邊的印度、斯里蘭卡等國家，數以萬計的人感染基孔肯雅熱，2006年上半年，僅印度南部喀拉拉邦(Kerala)暴發由蚊子傳播的基孔肯雅熱，最少造成了87人死亡；2005年3月，太平洋島國留尼汪的官方數據顯示，全國20％的人口約157000人被基孔肯雅病毒感染，死亡77人。周邊國家如此嚴峻的形勢正在威脅著我們，我國自從加入WTO后，經國境口岸的人員和貨物往來極其頻繁，登革、西尼羅、基孔肯雅等病毒隨時都有可能被感染的人或蚊蟲帶入的危險。亟待建立快速鑒別和檢測的方法并進行應用。

登革熱、黃熱、西尼羅熱和基孔肯雅熱四種疾病都是通過帶毒蚊子叮咬人而傳播，發病初期癥狀極其相似，難以鑒別；并且具有傳染快、易流行等特點，一旦發生，將嚴重威脅人們健康和社會安定。為了有效防控上述蟲媒病毒性疾病的發生與傳播，在疾病發生早期實行快速診斷是一個重要的環節，而對于各出入境口岸來說，在不影響入境人員和貨物快速通關前提下，如能在有效時間內，實現對人員以及船艙、貨物中可能攜帶的蚊子進行快速篩查；同時，快速檢測各口岸周邊環境中蚊子攜帶病毒情況、建立有效防控網絡，以防上述病毒的傳入，將具有非常重大的意義。