[發明專利]一種鑒定水稻紋枯病菌Sdh基因核苷酸點突變及其對噻呋酰胺抗藥性的方法

有效

• 申請號: 201210281520.5
• 申請日: 2012-08-09
• 公開（公告）號: CN102864220A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 劉西莉;牟文君;李波濤;劉鵬飛;李健強;王厚涵;林東
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/02;C12N15/11;C12N15/31;C07K14/37
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種檢測或輔助檢測水稻紋枯病菌中sdhB基因是否存在突變位點的方法，包括如下步驟：

以待測水稻紋枯病菌的基因組DNA為模板，用SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示引物對進行PCR擴增，若能擴增出條帶，則所述待測水稻紋枯病菌中sdhB基因存在或候選存在突變位點；

所述突變位點指水稻紋枯病菌中sdhB基因的基因組序列自5’末端起第975位核苷酸為C和T雜合或T純合。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增中，退火溫度為56℃。

3.一種檢測或輔助檢測水稻紋枯病菌中sdhB基因是否存在突變位點的方法，包括如下步驟：

以待測水稻紋枯病菌的基因組DNA為模板，擴增得到sdhB基因，再用NlaIV酶切所得sdhB基因，若酶切產物中含有230bp片段，則所述待測水稻紋枯病菌中sdhB基因存在或候選存在突變位點；

所述突變位點指水稻紋枯病菌中sdhB基因的基因組序列自5’末端起第975位核苷酸為C和T雜合或T純合。

4.一種檢測或輔助檢測水稻紋枯病菌中sdhB基因是否存在突變位點的引物對，由SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示DNA分子組成。

5.水稻紋枯病菌中sdhB基因的一個突變位點，為水稻紋枯病菌中sdhB基因的基因組序列自5’末端起第975位核苷酸為C和T雜合或T純合。

6.水稻紋枯病菌中sdhB蛋白的一個突變位點，為水稻紋枯病菌中sdhB蛋白的自N端起第249位氨基酸為組氨酸與酪氨酸雜合或純合的酪氨酸。

7.權利要求5或6所述突變位點在鑒定水稻紋枯病菌抗藥性中的應用；所述抗藥性為抗噻呋酰胺。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：存在所述突變位點的水稻紋枯病菌具有或候選具有抗藥性。

9.SEQ?ID?NO：3所示蛋白。

10.SEQ?ID?NO：4所示基因。