[發(fā)明專利]一種多溴聯(lián)苯同系物免疫原及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210280898.3
• 申請日: 2012-08-08
• 公開（公告）號: CN102898515A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 莊惠生;陳寒玉
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

1.一種多溴聯(lián)苯同系物免疫原，其特征在于，該免疫原的結(jié)構(gòu)式如下：

2.一種如權(quán)利要求1所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)PBB28半抗原4-(4，4′-二溴聯(lián)苯基)-4氧-丁酸的合成：

將丁二酸酐、4，4’-二溴聯(lián)苯溶解于非質(zhì)子性溶劑中，冰浴攪拌，無水三氯化鋁在冰水浴條件下投料，在1-2h內(nèi)分次加入，無水三氯化鋁加完后撤去冰水浴，在常溫條件下，隔水密封攪拌10-14h后加稀鹽酸終止反應(yīng)后，有機(jī)層用稀鹽酸水洗除去雜質(zhì)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，得黃色固體粉末粗品，重結(jié)晶，干燥，得到PBB28半抗原4-(4，4′-二溴聯(lián)苯基)-4氧-丁酸；

(2)PBB28人工免疫原PBB28-BSA的制備：

在0-5℃的條件下，將溶有N-羥基琥珀酰亞胺和N，N′-二環(huán)己基碳酰亞胺的有機(jī)溶液逐滴加入溶有PBB28半抗原的有機(jī)溶液中，攪拌反應(yīng)6-12h，4℃過夜，將離心分出的上層活化酯加入到pH為6.8-7.4，溶有牛血清白蛋白(BSA)的磷酸鹽緩沖溶液中，0-4℃的冰浴中攪拌反應(yīng)4-6h得到上清液，將上清液轉(zhuǎn)移到半透膜中，在pH為6.8-7.4的磷酸鹽緩沖溶液或0.9％生理鹽水透析5天，離心分出上清液，即得PBB28人工免疫原PBB-BSA偶聯(lián)物，經(jīng)柱提純，加入等量甘油-20℃下保存或者凍干保存。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述的非質(zhì)子性有機(jī)溶劑為二氯甲烷或硝基苯。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述的4，4’-二溴聯(lián)苯、丁二酸酐和無水AlCl₃的摩爾比為1∶1-2∶1-2.5。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，步驟(1)采用體積比為1∶1甲醇和乙醚組成的混合溶液進(jìn)行重結(jié)晶。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的有機(jī)溶液中采用的溶劑為N’N-二甲基甲酰胺或二甲基亞砜。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的多溴聯(lián)苯同系物免疫原的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的PBB28半抗原、N-羥基琥珀酰亞胺、N，N′-二環(huán)己基碳酰亞胺與牛血清白蛋白的摩爾比為1∶1-4∶1-4∶0.005-0.05。