[發明專利]一種水產品中氯霉素化學發光酶聯免疫檢測試劑盒及其檢測方法

無效

• 申請號: 201210280415.X
• 申請日: 2012-08-09
• 公開（公告）號: CN103575878A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 陳建軍;金偉;崔海容;馮漢利;李娟娟;余浩;曾憲東
• 申請（專利權）人: 湖北出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心;武漢百仕康生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

一種氯霉素的化學發光酶聯免疫分析試劑盒及其檢測方法，屬于化學發光免疫分析技術領域，用于水產品中氯霉素含量的檢測。?

背景技術

氯霉素(Chloramphenicol，CAP)最初是由委內瑞拉鏈絲菌的培養基中提取制得，是一類廣譜抗生素。氯霉素曾在我國畜牧業中廣泛應用，對畜禽的疾病控制和治療起到了重要作用。氯霉素存在著嚴重的毒副作用，能引起人的再生障礙性貧血，粒狀白細胞缺乏癥，新生兒、早產兒灰色綜合癥等，低濃度藥物殘留還會誘發致病菌的耐藥性，對人類的健康構成巨大的潛在威脅。在美國僅允許氯霉素應用于非食用性動物，規定在任何動物性食品中不得檢出氯霉素。歐共體禁止氯霉素應用于產奶牛和產蛋雞，在其他動物性食品中的含量也做了限制，規定最高殘留量為100ng/kg。中國農業部已將氯霉素從2002年版《中國獸藥典》中刪除列為禁藥，近年已規定在動物性食品中不得檢出。?

作為全國淡水漁業第一省的湖北水產業，續十三年淡水產品總量保持全國第一。我省現有水產加工企業180家，其中加工出口企業19家。作為國家明令禁止使用的獸藥，在水產品等動物源性食品中，氯霉素殘留一直被列為重點必檢項目之一。?

目前，應用廣泛的CAP檢測技術有液相色譜法(LC)、質譜法(MS)、高效液相色譜法(HPLC)、酶聯免疫吸附法(ELISA)等。LC等大型儀器分析方法對設備和操作者有較高要求，樣品處理方法復雜，檢測時間長。?

目前已申請的氯霉素檢測相關專利中較多是采用傳統的酶聯免疫吸附法檢測，如：江南大學申請號為02137940，名為《一種動物性食品中氯霉素酶聯免疫檢測試劑盒及其檢測方法》；中國農業大學申請號為200410037254，名為《檢測氯霉素的試劑盒》；中國農業大學申請號為200410037255，名為《一種檢測氯霉素的試劑盒》；中國農業大學申請號為200410037258，名為《氯霉素的酶聯免疫試劑盒》；中國農業大學申請號200410037259，名為《一種檢測氯霉素的酶聯免疫試劑盒》；北京望爾生物技術有限公司申請號200510086775，名為《一種檢測動物性食品中氯霉素類藥物的酶聯免疫試劑盒》等。這一方法中常用的顯色底物是四甲基聯苯胺(TMB)或者鄰苯二胺(OPD)，其中OPD具有致癌性，長期使用會對人體造成危害；且這類底物較不穩定易受外界干擾使最終測定結果受到影響，如光照或金屬離子會使底物自身顯色。酶聯免疫吸附法是以酶催化底物顯色，通常需顯色10——60分鐘，使顯色達到平臺期，顯色完畢后需用酸終止顯色測定結果。?

另外部分專利涉及到膠體金試紙法，如：博頓生物技術(杭州)有限公司申請號?200310109470，名為《檢測氯霉素的免疫膠體金試紙及其制備方法》；云南大學申請號200610019376，名為《氯霉素膠體金檢測試紙》等。該方法適操作簡便，用時短用于大批量樣品篩查，但靈敏度較低，結果不準確，易出現假陽性或假陰性。?

還有部分專利有采用液相色譜-串聯質譜測定方法，如：上海徐匯區中心醫院申請號200410067401，名為《一種蜂蜜中氯霉素殘留量的液相色譜-串聯質譜測定方法》；中國人民共和國江蘇出入境檢驗檢疫局申請號200810195887，名為《蜂產品中多類農獸藥殘留同時檢測的方法》，這類方法測定結果準確，但樣品前處理過程繁瑣，需要用大量有機溶劑，檢測需要大規模儀器。?

此外還有天津生機集團股份有限公司申請號200810053150，名為《一種飼料或者獸藥中違禁藥物的快速檢測方法》，該專利采用薄層色譜法檢測違禁藥物，這一方法操作簡便，但樣品處理過程中通常使用大量的有機溶劑，且檢測結果只能定性判不能準確檢測藥物含量。江南大學申請號200910027458，名為《一種快速檢測氯霉素的免疫磁珠層析試紙條及其制備方法》，采用免疫磁珠層析試紙條檢測該方法與膠體金試紙法類似。江蘇省原子醫學研究所申請號200910182284，名為《一種氯霉素的光激化學發光免疫分析試劑盒》，采用光激化學發光免疫分析法，該方法需突破多次標記，即將CAP-OVA包被在發光微粒上，合成生物素二抗，將鏈霉親和素包被在感光微粒上。本發明將具有高度靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，操作簡便，用時短，無需長時間顯色及終止，且靈敏度高，特異性好。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測氯霉素的化學發光酶聯免疫檢測試劑盒及其檢測方法，用于水產品中氯霉素含量的檢測。該試劑盒具有檢測靈敏度高、應用靈活、方便的特點。?