[發明專利]滿山白糖漿中三種黃酮類化合物含量同時測定的方法

有效

• 申請號: 201210276416.7
• 申請日: 2012-08-03
• 公開（公告）號: CN102788853A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 黃穎楨;陳菁瑛;趙云青;林峰
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院農業生物資源研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙) 35212
• 代理人: 宋連梅

【技術領域】

本發明涉及一種多組分同時測定的方法，尤其涉及一種滿山白糖漿中三種黃酮類化合物含量同時測定的方法。?

【背景技術】

滿山白是杜鵑科植物毛果杜鵑（Rhododendron?senniavinii?Maxim.）的干燥嫩枝和葉，具有祛痰止咳功效，是福建省地方藥材；滿山白止咳糖漿系列產品是以滿山白藥材作為主要原料的臨床應用中成藥。滿山白止咳糖漿系列產品中的金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素等黃酮類化合物是其藥理活性的物質基礎，金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素三者的含量水平直接影響到藥材原料的質量，并最終影響成藥的質量。開發并應用滿山白糖漿中黃酮類化合物的快速定量測定方法，是滿山白糖漿質量科學監控的必要手段。?

目前滿山白糖漿中金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素的相關檢測方法的主要文獻報道為《滿山白糖漿的質量標準研究》。所報道的方法是應用高效液相色譜方法分別對金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素進行單獨的定量測定，使得測定滿山白糖漿中多種黃酮類化合物的含量所需耗費的時間較長。因此，從業人員有待研究一種能夠同時對滿山白糖漿中的多種黃銅類化合物的含量進行測定的方法。?

【發明內容】

本發明所要解決的技術問題在于提供一種滿山白糖漿中三種黃酮類化合物含量同時測定的方法，?

本發明是通過以下技術方案解決上述技術問題的一種滿山白糖漿中三種黃酮類化合物含量同時測定的方法，所述三種黃酮類化合物分別為金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素；該方法操作如下：?

（1）標準溶液的制備：以2∶1∶1的質量比分別稱取適量純度為98%的金?絲桃苷、槲皮苷、槲皮素對照品并混合，之后采用甲醇對混合后的對照品進行溶解并定容以獲得標準溶液的母液，該母液的總濃度為4.000mg/mL，然后將母液稀釋成不同濃度梯度的標準溶液；?

（2）提取液的制備：取適量糖漿并加入水飽和正丁醇進行萃取，且糖漿和水飽和正丁醇的體積比為3∶1-1∶2，共萃取1-5次，合并萃取液，并將合并后的萃取液減壓濃縮至干得，之后加入甲醇溶解并轉入25mL容量瓶定容，然后采用45nm孔徑濾膜過濾即得滿山白糖漿黃酮類化合物的提取液，該提取液即為待測液；?

（3）高效液相色譜檢測：在色譜柱上，以乙腈-水為流動相，梯度洗脫分離黃酮類化合物，色譜條件如下：?

檢測儀器：高效液相色譜儀?

色譜柱：C18色譜柱；?

流動相：乙腈-水；?

柱溫：25℃；?

檢測波長：360nm；?

進樣量：20μL；?

流動相變化過程：0min～25min內，乙腈：水的體積比為70：30；25min～26min內，乙腈與水的體積比由70：30等度梯度轉變至60：40；26min～55min內，乙腈與水的體積比為60：40；?

（4）測定：分別取制備獲得的標準溶液及待測液，并采用上述色譜條件進行進樣檢測，記錄色譜圖，經過色譜儀器自帶軟件積分得到峰面積，計算得到待測液中金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素的濃度。?

進一步地，所述提取液的制備操作中超聲提取結束后將溶液采用濾紙進行過濾。?

本發明滿山白糖漿中三種黃酮類化合物含量同時測定的方法的有益效果在于：能夠對滿山白糖漿中三種黃酮類化合物即金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素的含量進行同時測定，從而減少了測定的步驟、降低了測定所需耗費的時間。?

【附圖說明】

下面參照附圖結合實施例對本發明作進一步的描述。?

圖1是本發明標準溶液的高效液相色譜圖。?

圖2是本發明實施例一中待測液高效液相色譜圖。?

圖3是本發明實施例二中待測液高效液相色譜圖。?

圖4是本發明實施例三中待測液高效液相色譜圖。?

【具體實施方式】

結合如下實施例對本發明滿山白糖漿中三種黃酮類化合物（即金絲桃苷、槲皮苷和槲皮素）含量同時測定的方法進行進一步說明。?

實施例一?

1．標準溶液的制備：分別稱取20mg金絲桃苷、10mg槲皮苷、10mg槲皮素對照品并混合，之后采用甲醇對混合后的對照品進行溶解并定容以獲得總濃度為4.000mg/mL的母液，然后將母液分別稀釋成6個濃度梯度，濃度梯度分別為母液濃度的0.01、0.1、0.2、0.5、0.8和1.0倍；其中金絲桃苷、槲皮苷、及槲皮素對照品的純度均為98%。?