[發(fā)明專(zhuān)利]滿山白糖漿中三種黃酮類(lèi)化合物含量同時(shí)測(cè)定的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210276416.7
• 申請(qǐng)日: 2012-08-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102788853A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-11-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃穎楨;陳菁瑛;趙云青;林峰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物資源研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/06
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 福州市鼓樓區(qū)京華專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 35212
• 代理人: 宋連梅

1.一種滿山白糖漿中三種黃酮類(lèi)化合物含量同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于：所述三種黃酮類(lèi)化合物分別為金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素；該方法操作如下：

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：以2∶1∶1的質(zhì)量比分別稱(chēng)取適量純度為98%的金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素對(duì)照品并混合，之后采用甲醇對(duì)混合后的對(duì)照品進(jìn)行溶解并定容以獲得標(biāo)準(zhǔn)溶液的母液，該母液的總濃度為4.000mg/mL，然后將母液稀釋成不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

（2）提取液的制備：取適量糖漿并加入水飽和正丁醇進(jìn)行萃取，且糖漿和水飽和正丁醇的體積比為3∶1-1∶2，共萃取1-5次，合并萃取液，并將合并后的萃取液減壓濃縮至干，之后加入甲醇溶解并轉(zhuǎn)入25mL容量瓶定容，然后采用45nm孔徑濾膜過(guò)濾即得滿山白糖漿黃酮類(lèi)化合物的提取液，該提取液即為待測(cè)液；

（3）高效液相色譜檢測(cè)：在色譜柱上，以乙腈-水為流動(dòng)相，梯度洗脫分離黃酮類(lèi)化合物，色譜條件如下：

檢測(cè)儀器：高效液相色譜儀；

色譜柱：C18色譜柱；

流動(dòng)相：乙腈-水；

柱溫：25℃；

檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm；

進(jìn)樣量：20μL；

流動(dòng)相變化過(guò)程：0min～25min內(nèi)，乙腈：水的體積比為70：30；25min～26min內(nèi)，乙腈與水的體積比由70：30等度梯度轉(zhuǎn)變至60：40；26min～55min內(nèi)，乙腈與水的體積比為60：40；

（4）測(cè)定：分別取制備獲得的標(biāo)準(zhǔn)溶液及待測(cè)液，并采用上述色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣檢測(cè)，記錄色譜圖，經(jīng)過(guò)色譜儀器自帶軟件積分得到峰面積，計(jì)算得到待測(cè)液中金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素的濃度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述滿山白糖漿中三種黃酮類(lèi)化合物含量同時(shí)測(cè)定的方法，其特征在于：所述提取液的制備操作中超聲提取結(jié)束后將溶液采用濾紙進(jìn)行過(guò)濾。