[發(fā)明專利]模擬移動床分離制備甘草苷的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210274970.1
• 申請日: 2012-08-04
• 公開（公告）號: CN103570779A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張大兵;張寧;羅軍俠;王亞輝;李勝迎
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號: C07H15/26
• 分類號: C07H15/26;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及的是模擬移動床分離制備甘草苷的方法，具體是采用加熱回流提取、大孔樹脂精制并用模擬移動床對甘草總黃酮中的甘草苷進(jìn)行分離純化的方法。

背景技術(shù)

甘草黃酮是中藥甘草中含有的一大類化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)多樣。甘草苷，分子式C₂₁H₂₂O₉，相對分子質(zhì)量418.39，熔點(diǎn)212-213℃，是甘草黃酮類化合物中重要的單體活性成分，具有抗氧化、抗HIV等多種藥理作用。由于甘草苷在甘草原料中含量偏低，傳統(tǒng)的提取分離技術(shù)工藝程序繁瑣、操作復(fù)雜，且純度也不高，本方法采用醇提后直接過大孔樹脂精制，并用模擬移動床色譜進(jìn)行分離甘草苷，得到了高純的的結(jié)晶產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種從甘草中提取甘草總黃酮的生產(chǎn)工藝并用模擬移動床分離甘草苷的方法，屬于天然產(chǎn)物的提取分離純化領(lǐng)域，包括醇提取、大孔樹脂精制、模擬移動床分離、重結(jié)晶以及成品的純度檢測。

本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的采用如下步驟：

a、提取：將粉末過60目篩后置于提取器中，95%乙醇為溶劑，70℃水浴回流2個小時(shí)，提取2-3次，合并提取液，減壓濃縮成稠膏狀；

????b、大孔樹脂精制：a步驟的濃縮物加入蒸餾水溶解，過濾，棄去沉淀，過濾液上AB-8樹脂柱，然后分別用蒸餾水、40%乙醇、80%乙醇和95%乙醇洗脫樹脂柱，收集40%乙醇和80%乙醇洗脫部位，減壓回收乙醇，濃縮物真空干燥得甘草總黃酮提取物；

????c、模擬移動床分離：將b步驟得到的甘草總黃酮提取物用甲醇：水=20:80混合溶液溶解作為模擬移動床色譜的進(jìn)樣原料進(jìn)行連續(xù)分離提純，即制得純度為90%以上的甘草苷液體，減壓濃縮，濃縮物60℃恒溫干燥，即得甘草苷粉末；

????d、重結(jié)晶：將c步驟中得到的甘草苷粉末用乙醇水重結(jié)晶，得白色晶體；

???e、成品的純度檢測：泵：NewstyleNP7000型泵；色譜柱(ODS填料4.6*250mm，5μm)；檢測器：漢邦紫外檢測器NewstyleNU3000，檢測波長：254nm，檢測溫度：室溫；?流動相：甲醇:水(1%的冰醋酸)=25:75，流速：1mL/min；峰面積歸一化法測得甘草苷的純度為95%以上。

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具體實(shí)施方式

實(shí)施方案一

1、提取：將粉末過60目篩后稱取10g置于提取器中，用60mL95%乙醇提取，70℃水浴回流2個小時(shí)，提取2次，合并提取液，減壓濃縮至15mL；

2、大孔樹脂精制：濃縮液加入75mL蒸餾水溶解，過濾，棄去沉淀，過濾液上AB-8樹脂柱，然后分別用蒸餾水、40%乙醇、80%乙醇和95%乙醇洗脫樹脂柱，洗脫劑用量分別為400mL，收集40%乙醇和80%乙醇洗脫部位，減壓回收乙醇，濃縮物真空干燥得甘草總黃酮提取物；

3、模擬移動床分離：將甘草總黃酮提取物用甲醇：水=20:80混合溶液溶解，濃度為0.2g/mL，作為模擬移動床色譜的進(jìn)樣原料；對模擬移動床的操作參數(shù)進(jìn)行選擇，確定參數(shù)如下：進(jìn)樣流速0.1mL/min，洗脫流速1.5mL/min，提取液流速1mL/min，切換時(shí)間21min，溫度控制在30-35℃；從提取液出口得到純度為92%的甘草苷液體，減壓濃縮，濃縮物60℃恒溫干燥，即得甘草苷粉末；

4、重結(jié)晶：將得到的甘草苷粉末用乙醇水重結(jié)晶，得白色晶體，經(jīng)HPLC檢測純度為98%。

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實(shí)施方案二

1、提取：將粉末過60目篩后稱取50g置于提取器中，用300mL95%乙醇提取，70℃水浴回流2個小時(shí)，提取2次，合并提取液，減壓濃縮至60mL；

2、大孔樹脂精制：濃縮液加入300mL蒸餾水溶解，過濾，棄去沉淀，過濾液上AB-8樹脂柱，然后分別用蒸餾水、40%乙醇、80%乙醇和95%乙醇洗脫樹脂柱，洗脫劑用量分別為2000mL，收集40%乙醇和80%乙醇洗脫部位，減壓回收乙醇，濃縮物真空干燥得甘草總黃酮提取物；

3、模擬移動床分離：將甘草總黃酮提取物用甲醇：水=20:80混合溶液溶解，濃度為0.2g/mL，作為模擬移動床色譜的進(jìn)樣原料；對模擬移動床的操作參數(shù)進(jìn)行選擇，確定參數(shù)如下：進(jìn)樣流速0.2mL/min，洗脫流速2.0mL/min，提取液流速1.2mL/min，切換時(shí)間20min，溫度控制在30-35℃；從提取液出口得到純度為91.2%的甘草苷液體，減壓濃縮，濃縮物60℃恒溫干燥，即得甘草苷粉末；