[發明專利]以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體及其培育方法

無效

• 申請號: 201210271767.9
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102763560A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: 徐正華;沈金德;徐窕;沈娟麗
• 申請（專利權）人: 桐鄉市中泰蟲草專業合作社
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C05G3/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術領域

本發明涉及一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體及其培養方法。

背景技術

蟬花(Cordyceps?sobolifera；C.cicadae)也稱蟬蛹草，是一種具有動物和植物特征的奇妙生物復合體，其生物根是蟬蛹或山蟬的幼蟲體，花是從單個或是2-3個蟬幼蟲頭部生長出來的，約一寸多長，從頂端開花、分枝。蟬花屬于生物病態現象，是一種蟲菌相依的組合體。秋季來臨，蟬鉆入土中，逐漸變成蟬蛹，在羽化前被蟲草菌類寄生，當生活備件適宜時，就開始在蟲體內萌發成菌絲體，吸收蟲體的營養，最終蟲體被菌絲體完全占有而只剩下一個軀殼。萬物復蘇時節，菌絲體又從營養階段轉化為有性階段，漸漸從頂端開花分枝，故而得名蟬花，主要分布于安徽、浙江、福建、廣東、四川、云南、江蘇等地。

南北朝時期雷斅寫的《雷公炮灸論》中記載道：“蟬花，凡使，要白花全者。收得后于屋下東角懸干，去甲、土后，用漿水煮一日，至夜焙干，研細用之。”這是迄今為止發現的，關于蟬花最早的文字記載。同時也是關于蟲生真菌最早的文字記載。而《雷公炮灸論》則為我國最早的中藥炮灸學專著。書中記載了300多味中草藥的加工方法，距今1500年，比冬蟲夏草的記載整整提早了800年。專家們據此推測，在3000年前，我們的祖先就認識蟬花，并對其藥用價值有所了解。此后，專家們又從《本草綱目》上查到了有關蟬花用途的記載。從北宋中葉蘇頌撰寫的《圖經本草》中看到了有關蟬花的記載：“今蜀中有一種蟬，其蛻殼頭上有一角，如花冠狀，謂之蟬花。醫工云：人藥最奇。”從宋代唐慎微的《征類本草》，以及明朝李時珍的《本草綱目》也都找到了有關蟬花記載。

金蟬，又名知了猴，隸屬于同翅目蟬科中型到大型昆蟲，營養價值高，還具有良好的藥用價值，金蟬含蛋白質，為牛肉的2.5倍，雞肉的2倍，又由于含有人體必需的多種營養素，對促進生長發育，體虛患者康復等，都有極佳的輔助治療作用，是天然無公害高效營養食品，特別是金蟬能進行大規模人工飼養，為生產蟬花提供穩定安全的原料來源，因此，用金蟬幼蟲進行人工培養研究蟬花具有廣闊的產業化應用前景。在自然界蟬幼蟲寄主蟲草菌完成一個世代需3年以上時間，這表明形成蟬花有性型的時間長，而且在自然界菌蟲感染率低。

中國發明專利CN200810068632公開了一種蟬花的人工培養方法，(1)分離原始菌株，(2)培養蟬花擬青霉，及用蟬擬青霉孢子感染家蠶老熟幼蟲。以上采用老熟家蠶幼蟲。此外，一些生物學專家采用液體深層發酵的方法解決對蟬花市場的需求，由于液體發酵生產只有菌絲體，沒有蟲體。另外用大米、小麥等作培養基生產的蟬花子實體也沒有蟬蟲體，無法獲得和天然同樣外形的蟬花，而用蟬幼蟲生產蟬花目前尚無相關報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種感染率高、出草率高的蟬花子實體及其培育方法。

為了達到上述目的，本發明提供了一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體的培育方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：將蛹蟲草子實體在固體培養基上經孢子分離提純復壯，得到蛹蟲草菌絲體，培養溫度為20℃，培養時間12天，淘汰絨毛多不轉色的菌絲體，挑選轉色好，轉色快，貼著培養基長勢快的菌絲體留種；

第二步：在20℃-22℃，120r/m的條件下，將第一步得到的留種菌絲體經用液體培養基振蕩培養4-5天，并且有小菌球充滿液體培養基，制成液體菌種；

第三步：用消毒劑對金蟬幼蟲進行浸泡消毒10分鐘，然后用無菌水洗三次，用紫外燈照2小時，最后在蟬幼蟲身體上用無菌針扎多個小洞，用無菌注射器吸入第二步得到的液體菌種注入蟬幼蟲體后背；

第四步：將第三步得到的已注射感染的蟬幼蟲置于無菌的組培瓶內，用注射器將0.1ml液體菌種注入蟬幼蟲外體，蓋上瓶蓋，黑暗保濕培養3天，溫度為18℃-23℃，濕度為80-100％；然后在20℃下培養20天，光照為12h/d，光照強度為在150-2501x，打開瓶蓋，注入2ml無菌水，繼續培養30-40天，至蟬花子實體長至3cm及以上長，即收獲。

優選地，所述第一步中的固體培養基的成份為：以重量百分比計的蔗糖1.5％，馬鈴薯2％，KH₂PO₄0.25％，MgSO₄·7H₂O?0.15％，維生素B₁0.01％，瓊脂1.6％和蛋白胨0.8％。