[發明專利]以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體及其培育方法

無效

• 申請號: 201210271767.9
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102763560A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: 徐正華;沈金德;徐窕;沈娟麗
• 申請（專利權）人: 桐鄉市中泰蟲草專業合作社
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C05G3/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體的培育方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：將蛹蟲草子實體在固體培養基上經孢子分離提純復壯，得到蛹蟲草菌絲體，培養溫度為20℃，培養時間12天，淘汰絨毛多不轉色的菌絲體，挑選轉色好，轉色快，貼著培養基長勢快的菌絲體留種；

第二步：在20℃-22℃，120r/m的條件下，將第一步得到的留種菌絲體經用液體培養基振蕩培養4-5天，并且有小菌球充滿液體培養基，制成液體菌種；

第三步：用消毒劑對金蟬幼蟲進行浸泡消毒10分鐘，然后用無菌水洗三次，用紫外燈照2小時，最后在蟬幼蟲身體上用無菌針扎小洞8個，前胸4個，后胸4個，用無菌注射器吸入第二步得到的液體菌種注入蟬幼蟲體后背；

第四步：將第三步得到的已注射感染的蟬幼蟲置于無菌的組培瓶內，用注射器將0.1ml液體菌種注入蟬幼蟲外體，蓋上瓶蓋，黑暗保濕培養3天，溫度為18℃-23℃，濕度為80-100％；然后在20℃下培養20天，光照為12h/d，光照強度為在150-250lx，打開瓶蓋，注入2ml無菌水，繼續培養30-40天，至蟬花子實體長至3cm及以上長，即收獲。

2.根據權利要求1所述的一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體的培育方法，其特征在于，所述第一步中的固體培養基的成份為：以重量百分比計的蔗糖1.5％，馬鈴薯2％，KH₂PO₄0.25％，MgSO₄·7H₂O?0.15％，維生素B₁0.01％，瓊脂1.6％和蛋白胨0.8％。

3.根據權利要求1所述的一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體的培育方法，其特征在于，所述第二步中的液體培養基的成份為：以重量百分比計的蔗糖3％，馬鈴薯2％，KH₂PO₄?0.3％，MgSO₄·7H₂O?0.15％，維生素B₁?0.01％，瓊脂0.05％和蛋白胨1％。

4.根據權利要求1所述的一種以蟬幼蟲為寄主的蟬花子實體的培育方法，其特征在于，所述的第三步中多個小洞的具體數量為8個，分別為前胸4個，后胸或后背4個。