[發明專利]一種VEFG受體酶聯診斷試劑盒及其制備方法無效
| 申請號： | 201210271348.5 | 申請日： | 2012-07-31 |
| 公開（公告）號： | CN102854322A | 公開（公告）日： | 2013-01-02 |
| 發明（設計）人： | 吳克 | 申請（專利權）人： | 吳克 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 上海精晟知識產權代理有限公司 31253 | 代理人： | 何新平 |
| 地址： | 201206 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 vefg 受體 診斷 試劑盒 及其 制備 方法 | ||
1.一種VEGF受體酶聯檢測試劑盒，其特征在于，所述VEGF受體酶聯診斷試劑盒包括：酶聯板、陽性對照、陰性對照、樣品稀釋液、酶聯物、濃縮洗滌液、顯色劑A＆B、終止液和封板膠紙；
其中：酶聯板為血管內皮細胞生長因子(VEGF)受體包被的酶聯反應板；
酶聯物為辣根過氧化物酶標記血管內皮生長因子單克隆抗體。
2.根據權利要求1所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒，其特征在于：
所述陽性對照為血管內皮細胞生長因子蛋白凍干粉；
所述陰性對照為動物血清凍干粉；
所述樣品稀釋液為0.05%吐溫-20～80，l%牛血清白蛋白，l0mM乙二胺四乙酸二鈉，0.05%硫柳汞，0.4M?NaCl，pH6.5；
所述濃縮洗滌液為137mM?NaCl，2.7mM?KC1，l0mM?Na2HP04，2mMKH2P04，0.05%吐溫20，Ph7.4：
所述顯色劑A液為H2O2溶液，所述顯色劑B液為3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺溶液；
所述終止液為2MH2S04溶液。
3.根據權利要求1所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒，其特征在于：各物質的量以酶聯板的孔數為標準。
4.根據權利要求1所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒，其特征在于：所述酶聯板為96孔。
5.一種權利要求1所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒的制備和操作方法，其特征在于，主要步驟為：
(a)將血管內皮細胞生長因子受體包被于固體支持物酶聯反應板上；
(b)用封閉液封閉；
(c)特生物標本加入到預包被的酶聯反應板反應孔中，生物標本中的血管內皮細胞生長因子特異地與血管內皮細胞生長因子受體結合；
(d)用血管內皮細胞生長因子單克隆抗體檢測血管內皮細胞生長因子；
(e)顯色底物為3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺溶液。
6.根據權利要求5所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒的制備和操作方法，其特征在于：步驟a所述的血管內皮細胞生長因子受體用昆蟲細胞表達。
7.根據權利要求5所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒的制備和操作方法，其特征在于：步驟c所述的生物標本為癌癥、血管病、糖尿病視網膜病及類風濕關節炎生物個體的血清、血漿、腦脊液、唾液、組織提取液或尿液。
8.根據權利要求5所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒的制備和操作方法，其特征在于：步驟d所述的血管內皮細胞生長因子單克隆抗體是用血管內皮細胞生長因子免疫小鼠所得。
9.根據權利要求5所述的VEGF受體酶聯檢測試劑盒的制備和操作方法，其特征在于：步驟d所述的單克隆抗體用辣根過氧化物酶標記。
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