[發(fā)明專利]一種多肽片段及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210271177.6
• 申請(qǐng)日: 2012-08-01
• 公開（公告）號(hào): CN102807612A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李臣鴻;汪俊漢;陳正望
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;A61K38/17;A61P5/50;A61P3/10
• 代理公司: 武漢華旭知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 42214
• 代理人: 劉榮

1.一種多肽，其氨基酸序列如下：

KGNDISSGTVLSDYVGSGPPKGTGLHRYVWLV。

2.如權(quán)利要求1所述的多肽在生物醫(yī)藥上被認(rèn)可的經(jīng)修飾的多肽，其氨基酸序列如下：KGNDISSGTVLSDYVGSGPPKGTGLHRYVWLV。

3.如權(quán)利要求1所述的多肽的制備方法，其特征在于采用以下步驟：

（1）、將豬腸道洗凈后浸入沸水中浸泡3～7分鐘，浸泡完成后取出冷凍并剁碎，然后在0～10°C條件下用醋酸對(duì)腸道進(jìn)行浸取后過濾得浸出液，用鹽酸對(duì)浸出液中的浸出物洗脫并抽濾得耐熱腸多肽；

（2）、將耐熱腸多肽溶解于水中，加入抗氧化劑及足量異丙醇溶液，室溫下充分靜置后離心除去沉淀，然后再加入足量溫度為-25℃～-15℃的異丙醇溶液并在-25℃～-15℃條件下充分靜置后抽濾去除沉淀，將所得濾液的PH值調(diào)節(jié)為5.8～6.1，再在-25℃～-15℃條件下充分靜置后抽濾得白色沉淀，將白色沉淀充分洗滌后即制得粗肽；

（3）、將步驟（2）中制得的粗肽溶解于醋酸溶液中制得肽溶液，將肽溶液過柱層析分離得到分離物，選取分離物中具有刺激胰腺分泌胰島素功能的一份，將其凍干即得粗提取物；

（4）、將粗提取物溶解于碳酸氫銨溶液中并攪拌，離心后去除沉淀得上清液，將所得上清液過柱層析并采用PH值為8.0、濃度為0.02mol/L的碳酸氫銨溶液進(jìn)行洗滌，洗滌后得到的洗滌物凍干，再將洗滌物經(jīng)過兩次高效液相色譜分離后，將分離物凍干即制得權(quán)利要求1所述氨基酸序列的多肽。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：步驟（1）中醋酸的濃度為0.5mol/L，鹽酸的濃度為0.2mol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中抗氧化劑為硫二甘醇，添加量為1.2毫升；洗滌分兩次進(jìn)行，第一次洗滌選用異丙醇溶液，第二次洗滌選用乙醚溶液，第二次洗滌完成后將白色沉淀放入真空環(huán)境中使乙醚在真空中蒸發(fā)。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述步驟（4）中的兩次高效液相色譜分離中，第一次分離所用洗提液為0.1％的三氟乙酸水溶液，第二次分離所用洗提液為0.1％的三氟乙酸的乙腈溶液。

7.權(quán)利要求1所述多肽的用途，其特征在于：用于制造刺激胰腺分泌胰島素的藥物。

8.權(quán)利要求2所述多肽在生物醫(yī)藥上被認(rèn)可的經(jīng)修飾的多肽的用途，其特征在于：用于制造刺激胰腺分泌胰島素的藥物。