[發明專利]一種培養基及其應用與賴氨酸搖瓶發酵方法

無效

• 申請號: 201210268475.X
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102766662A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: 張軍華;熊結青;吳曉艷;盧宗梅;馮志菲
• 申請（專利權）人: 中糧生物化學（安徽）股份有限公司
• 主分類號: C12P13/08
• 分類號: C12P13/08;C12R1/15;C12R1/19;C12R1/13
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 周建秋;王鳳桐

技術領域

本發明涉及一種特別適用于賴氨酸搖瓶發酵的培養基及其在賴氨酸搖瓶發酵中的應用以及使用該培養基進行賴氨酸搖瓶發酵的方法。

背景技術

在賴氨酸發酵過程中，隨著營養物質的消耗，發酵液pH值會不斷下降，因此需要定時添加氨水或液氨來控制pH值以保證菌種的正常生長代謝，獲得高含量的賴氨酸。尤其在進行賴氨酸的搖瓶發酵以獲得賴氨酸產量高的菌株時，目前一般通過人工定時取樣檢測pH值并滴加氨水或液氨來調節pH值。

但是人工調節pH值不好把握分寸，每次添加氨水或液氨至少需要進行2次pH值的測定，調節pH值耗費的時間較長且很容易添加過量，從而影響發酵結果。而且頻繁取樣檢測會加大染菌的幾率。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種培養基及其在賴氨酸搖瓶發酵中的應用以及使用該培養基進行賴氨酸搖瓶發酵的方法。

為了實現上述目的，一方面，本發明提供一種培養基，該培養基含有碳源、氮源、無機鹽和水，其特征在于，該培養基還含有指示劑，所述指示劑的變色pH范圍為5.5-8。

另一方面，本發明提供一種上述培養基在賴氨酸搖瓶發酵中的應用。

再一方面，本發明提供一種賴氨酸搖瓶發酵方法，該方法包括將賴氨酸發酵菌種接種到培養基中進行搖瓶發酵，其特征在于，所述培養基為上述培養基。

通過上述技術方案，操作人員不需要進行取樣檢測pH值即可以直接根據培養基的顏色變化確定補加氨水或液氨的時間和加量，簡化了發酵操作過程，縮短了調節pH值耗費的時間，降低了操作人員的勞動強度，進而降低了染菌幾率。另外，添加的指示劑不會對發酵產生負面影響。因此，使用本發明的培養基進行賴氨酸搖瓶發酵時，發酵的穩定性明顯增強。

本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。

具體實施方式

以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。

本發明中，術語“波美度”是表示溶液濃度的一種方法，是通過波美比重計檢測溶液得到的度數；“發酵液”是指接種了微生物菌種的液體發酵培養基，經過一段時間的培養后所得產物；“指示劑的變色pH范圍”指的是指示劑的變色pH點所在的范圍。

本發明的培養基含有碳源、氮源、無機鹽和水，其特征在于，該培養基還含有指示劑，所述指示劑的變色pH范圍為5.5-8。

本領域技術人員所公知的是：指示劑一般以溶液的形式使用，可以直接商購獲得，也可以購買粉末狀產品再配制成溶液使用，且配制時使用的溶劑和配制方法為常規試劑與方法，例如，中性紅一般以0.1-0.3重量%濃度的溶液形式使用，配制方法包括先將0.1-0.3克中性紅溶于60ml濃度為100%的乙醇中，再加水至100ml。

根據本發明，相對于每升培養基，所述指示劑的添加量優選為0.002-0.012克。當指示劑的添加量在上述優選范圍內時，顯色明顯且不會對賴氨酸發酵產生影響。

需要說明的是，本發明中，指示劑的添加量以指示劑的干重計，即當所述指示劑以溶液形式使用時，指示劑的添加量不包括其中溶劑的量。

根據本發明，只要所述指示劑的變色pH范圍在上述范圍內即可實現本發明的目的，優選地，所述指示劑的變色pH范圍為6.5-8。

優選地，所述指示劑為中性紅、溴百里酚藍、酚紅、苯酚紅和石蕊中的一種。

根據本發明，所述培養基可以作為種子培養基，也可以作為發酵培養基，所述種子培養基與發酵培養基可以相同或不同。

根據本發明，只要往培養基中添加指示劑即可實現本發明的目的，對培養基的其他成分（碳源、氮源和無機鹽）無特殊要求，可以采用本領域常規使用的物質，例如，可以用淀粉質原料糖化清液、玉米漿、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、硫酸銨、蘇氨酸和蛋氨酸等配制種子培養基。根據本發明，每升種子培養基中各原料的用量可以在很大范圍內改變，優選情況下，相對于每升種子培養基，淀粉質原料糖化清液的用量可以為30-40克，玉米漿（干重為20-50重量%）的用量可以為70-90克，磷酸氫二鉀的用量可以為0.5-1.5克，硫酸鎂的用量可以為0.4-1.1克，硫酸銨的用量可以為5-15克，蘇氨酸的用量可以為0.1-0.6克，蛋氨酸的用量可以為0.1-0.3克。