[發明專利]堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料、固相萃取柱及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210268083.3
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102755881A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 李小燕;李梅;雷福厚;李鵬飛
• 申請（專利權）人: 廣西民族大學
• 主分類號: B01J20/285
• 分類號: B01J20/285;B01J20/26;B01J20/30;C08F220/06;C08F2/44;C08J9/28
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

技術領域

本發明涉及食品安全檢測技術領域，尤其是一種堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料、固相萃取柱及其制備方法和應用。

背景技術

堿性橙Ⅱ（Basic?OrangeⅡ），化學名為2，4-二胺基偶氮苯，俗名“王金黃”，化學分子式為C₁₂H₁₂N₄·HCl，分子量為248.5，由苯胺重氮化后，與間苯二胺偶合而制得，是一種偶氮類堿性工業染料。堿性橙為紅褐色結晶性粉末或有綠色光澤的褐色塊狀晶體，主要用于皮革制品、紡織品及木制品的染色。據調查其具有高致癌、致畸變性等危害，中國、美國及歐盟等都禁止用作食品添加劑。

在食品殘留檢測中，樣品前處理過程對分析結果的確準性、可靠性至關重要。固相萃取（Solid?Phase?Extraction，簡稱SPE）是近年發展起來的一種新型樣品前處理技術，其結合了液固萃取和柱液相色譜技術的優點，主要用于樣品的分離、純化和富集，能更有效地將待測組分與樣品基體或干擾物質分離，減少樣品前處理步驟，具有使用有機溶劑量少，操作簡單、快速、分離效率高等優勢。SPE在食品殘留分子的檢測中已被廣泛應用，成為食品樣品分離純化的重要技術。

常規固相萃取柱的裝填材料主要有鍵合硅膠固相萃取材料、無機基質固相萃取材料和有機聚合物固相萃取材料，它們分離選擇性不高。分子印跡固相萃取（Molecularly?Imprinted?Solid?Phase?Extraction，MISPE）利用分子印跡聚合物(Molecularly?Imprinted?Polymer，MIP)的特異選擇性吸附機理制備SPE填料，由于MIP對模板分子具有特異選擇性和親合性，而且其受酸、堿、有機溶劑和加熱等環境因素影響很小，可以克服食品樣品體系復雜、預處理程序煩瑣等不利因素，實現復雜食品樣品基體中低濃度目標物的分離富集，提高SPE的凈化效果及分析檢測方法的靈敏度。

目前分子印跡技術所用交聯劑（如乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)、三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸(TRIM)等）多為直鏈型分子，種類較單一。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料及其制備方法，以方便實現對堿性橙Ⅱ進行特異性、選擇性分離和富集。

本發明要解決的另一技術問題是提供一種堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取柱及其制備方法，以方便實現對食品中的堿性橙Ⅱ進行特異性吸附、選擇性分離純化和富集，并能結合高效液相色譜法實現食品中微量堿性橙Ⅱ的快速、高效的分離檢測，利于在食品安全檢測中的推廣和應用。

本發明要解決的再一技術問題是提供一種堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取柱在選擇性分離、純化和富集食品樣品中堿性橙Ⅱ方面的應用。

為解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料，以堿性橙Ⅱ為模板分子、丙烯酰胺為功能單體、馬來松香乙二醇丙烯酸酯為交聯劑、偶氮二異丁腈為引發劑制備。

堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料是由原料堿性橙Ⅱ、丙烯酰胺、馬來松香乙二醇丙烯酸酯、偶氮二異丁腈按投料量比0.1～3mmol:2～60mmol:3～90mmol:0.1～1.2g制成的分子印跡聚合物微粒。

分子印跡聚合物微粒的平均粒徑為180～250μm。

堿性橙Ⅱ分子印跡固相萃取填料的制備方法，以堿性橙Ⅱ為模板分子、丙烯酰胺為功能單體、馬來松香乙二醇丙烯酸酯為交聯劑、偶氮二異丁腈為引發劑，按投料量比0.1～3mmol:2～60mmol:3～90mmol:0.1～1.2g發生聚合反應，再洗脫除去模板分子堿性橙Ⅱ得到分子印跡聚合物微粒。

該制備方法包括以下步驟：

<1>將0.1～3mmol堿性橙Ⅱ用適量無水乙醇溶解，加入2～60mmol丙烯酰胺單體、3～90mmol交聯劑馬來松香乙二醇丙烯酸酯、0.1～1.2g偶氮二異丁腈、2～10mL大豆油、10～40mL乙酸乙酯，超聲20min，形成均勻有機相溶液A；溶液B為質量濃度0.10%的十二烷基硫酸鈉水溶液；取溶液B100～600mL置于三頸燒瓶中，將溶液A倒入溶液B中，加裝攪拌器、冷凝管和溫度計，室溫下恒速210～250r/min攪拌20min；程序升溫加熱聚合，溫度控制在75～95℃，反應3～5h，生成分子印跡聚合物；