[發明專利]包埋-交聯磷脂酶A1聚集體用于大豆毛油脫膠的方法

有效

• 申請號: 201210256605.8
• 申請日: 2012-07-24
• 公開（公告）號: CN102776065A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 于殿宇;江連洲;胡立志;王立琦;周曉丹;張春艷;宋云花;劉鑫;鄒小雨;李萬振;宋鵬;王玥
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C11B3/00
• 分類號: C11B3/00;C11B3/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體用于大豆毛油脫膠的方法，其特征在于用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠通過以下步驟實現：一、包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體的制備：將1mL酶加入到pH值為5.0的磷酸二氫鈉與檸檬酸緩沖液中，調節酶液濃度為0.02～0.07g/mL，在0℃下緩慢加入飽和度為65～90%的乙醇，在pH為3～8的條件下進行沉淀反應時間30min，持續攪拌，從而保證酶聚集體顆粒均勻，然后于10000r/min離心，收集沉淀；交聯磷脂酶A₁聚集體的制備及包埋過程：向聚集體懸浮液中加入體積濃度為0.2%戊二醛，攪拌進行交聯反應4h，離心去除上清液，用緩沖液沖洗交聯酶聚集體數次，直到洗液中檢測不到任何的活力，收集沉淀用磷酸鹽緩沖液懸?。辉谫|量濃度1%的20mL海藻酸鈉溶液中加入上述酶聚集體1mL，攪拌均勻，靜止5min后，用滅菌后的5mL注射器吸入上述混合液，以約5滴/s注入濃度0.1～0.35mol/L的CaCl₂溶液中制成微膠囊，將形成的微膠囊在4℃的CaCl₂溶液中放置一段時間使其進一步硬化；然后抽濾得到硬化的微膠囊，用無菌生理鹽水洗滌3～5次，以洗去表面的CaCl₂，然后進行冷凍干燥，得到包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體；二、取大豆毛油先經水化脫膠法去除大豆毛油中的水化磷脂，然后向經過處理的大豆毛油中加入質量濃度為35～50%、質量為大豆毛油0.5～2%的檸檬酸溶液并以500～1500r/min的速度攪拌5～20min，再向經過處理的大豆毛油中添加質量濃度為4%的NaOH溶液并不斷進行攪拌直至大豆毛油的pH值在4.0～6.0之間停止添加NaOH溶液；三、在40～60℃條件下向調整好pH值的大豆毛油中加入為調整好pH值的大豆毛油質量的0.1～0.5%的包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體；四、對加入包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體的大豆毛油以50～100r/min的速度攪拌1～10h，然后對加入包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體的大豆毛油以5000～8000r/min的速度離心1～5min，去除重相中的雜質，即實現用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠的工藝。

2.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟二中向經過處理的大豆毛油中加入質量濃度為40～45%、質量為大豆毛油1～1.8%的檸檬酸溶液并以600～1200r/min的速度攪拌7～15min。

3.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟二中向經過處理的大豆毛油中加入質量濃度為45%、質量為大豆毛油1.5%的檸檬酸溶液并以1000r/min的速度攪拌12min。

4.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟二中向經過處理的大豆毛油中添加質量濃度為4%的NaOH溶液并不斷進行攪拌直至大豆毛油的pH值在4.5～5.5之間時停止添加NaOH溶液。

5.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟三中在45～55℃條件下向調整好pH值的大豆毛油中加入為調整好pH值的大豆毛油質量的0.2～0.4%的包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體。

6.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟三中在55℃條件下向調整好pH值的大豆毛油中加入為調整好pH值的大豆毛油質量的0.25%的包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體。

7.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟四中對加入包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體的大豆毛油以50～80r/min的速度攪拌4～8h。

8.根據權利要求1所述的用包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體對大豆毛油進行脫膠，其特征在于步驟四中對加入包埋-交聯磷脂酶A₁聚集體的大豆毛油以6500～7500r/min的速度離心1～5min。