[發明專利]檢測藥物對人肝細胞色素P450抑制作用的方法

無效

• 申請號: 201210255174.3
• 申請日: 2012-07-23
• 公開（公告）號: CN102816830A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發明（設計）人: 郭澄;韓永龍;李丹;余奇;萬麗麗
• 申請（專利權）人: 上海市第六人民醫院
• 主分類號: C12Q1/26
• 分類號: C12Q1/26
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 劉懿

1.一種檢測藥物對人肝細胞色素P450抑制作用的方法，其特征在于，步驟包括：

步驟1，選擇人細胞色素P450的探針藥物，將測試藥物、探針藥物與含所述人細胞色素P450的微粒體共同孵育；

步驟2，孵育結束后，檢測探針藥物在其特異性亞酶作用下轉化生成代謝產物的量，代謝產物生成量越大，則測試藥物對所述人細胞色素P450抑制作用越小。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述含人細胞色素P450的微粒體為人肝微粒體。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述人細胞色素P450亞型選自CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4中的任意一種或其任意組合。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述亞型CYP1A2的探針藥物為非那西丁、CYP2C9的探針藥物為雙氯芬酸、CYP2C19的探針藥物為s-(+)美芬妥英、CYP2D6的探針藥物為右美沙芬、CYP3A4的探針藥物為咪達唑侖和睪酮中的任意一種或其混合物。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述非那西丁的代謝產物包括對乙酰氨基酚、所述雙氯酚酸的代謝產物包括4-羥基雙氯芬酸、所述s-(+)美芬妥英的代謝產物包括4-羥基美芬妥英、所述右美沙芬的代謝產物包括去甲右美沙芬、所述咪達唑侖的代謝產物包括1′-羥基咪達唑侖、所述和睪酮的代謝產物包括6β-羥基睪酮。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述孵育時間為1~60min。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，微粒體蛋白濃度為0.01~1mg/ml。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述探針藥物濃度為0.5~100μmol/L。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，以未加測試藥物組酶的活性為100%，然后檢測加入測試藥物后探針藥物產生代謝產物的量，與未加測試藥物組進行對比。

10.根據權利要求1或9所述的方法，其特征在于，還包括步驟3，將加入濃度梯度組測試藥物測得的探針藥物代謝產物生成速率與測試藥物濃度之間按照非線性回歸作圖，和/或計算半數抑制濃度IC₅₀。