[發明專利]儀寧小麥抗小麥黃花葉病毒主效QTL的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201210246844.5
• 申請日: 2012-07-17
• 公開（公告）號: CN102807984A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 王秀娥;郭嬌;吳真真;朱曉彪;王海燕;曹愛忠;肖進
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

1.‘儀寧小麥’中抗小麥黃花葉病主效QTL?QYm.nau-2D.1的分子標記2EST730，其特征在于該分子標記2EST730的上游引物2EST730F序列如SEQ?ID?NO.1所示，下游引物2EST730R序列如SEQ?ID?NO.2所示。

2.根據權利要求1所述‘儀寧小麥’中抗小麥黃花葉病主效QTL?QYm.nau-2D.1分子標記2EST730，其特征在于所述的分子標記2EST730與QYm.nau-2D.1之間的遺傳距離為0.3cM。

3.權利要求1所述的分子標記2EST730的引物對，其特征在于上游引物2EST730F序列如SEQID?NO.1所示，下游引物2EST730R序列如SEQ?ID?NO.2所示。

4.抗小麥黃花葉病主效QTL?QYm.nau-2D.1的分子標記方法，其特征在于包括：以待鑒定材料的DNA作為模板，用權利要求3所述的分子標記2EST730的引物對進行PCR擴增；PCR產物進行非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，再用銀染法檢測；能擴增出約600bp特異條帶的植株為含有抗小麥黃花葉病主效QTL?QYm.nau-2D.1的植株。

5.根據權利要求4所述的抗小麥黃花葉病主效QTL?QYm.nau-2D.1的分子標記方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）以待鑒定材料的DNA作為模板，用權利要求3所述的分子標記2EST730的引物對進行PCR擴增；

PCR試劑組成為：PCR試劑組成為：1μL?DNA模板，1.0μL10×PCR?buffer，0.8μL?MgCl₂，0.8μLdNTP，上、下游引物各0.2μL，0.15μL?Taq?DNA?polymerase，5.85μL?ddH₂O；

PCR程序為：94℃預變性3分鐘；94℃變性30秒，55℃退火50秒，72℃延伸1分10秒，35個循環；72℃延伸10分鐘；10℃保存；

PCR產物檢測：PCR產物在丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺質量比39:1的非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳分離，再用銀染法檢測；

（2）標記引物鑒定QYm.nau-2D.1的結果為：

能擴增出約600bp特異條帶的植株為含有QYm.nau-2D.1的植株。

6.權利要求1所述的分子標記2EST730在分子標記輔助選擇育種中的應用。

7.權利要求1所述的分子標記2EST730在選育抗小麥黃花葉病小麥品種中的應用。