[發明專利]一種快速測定植物多糖及糖甙的化學發光分析法

無效

• 申請號: 201210245583.5
• 申請日: 2012-07-16
• 公開（公告）號: CN103543144A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 符波;唐卿;唐凱;李新圃
• 申請（專利權）人: 符波;唐卿;上海復博實驗室裝備有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N1/34
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技術領域

本發明涉及分析化學領域，具體涉及一種快速測定菊科植物鹿草和甜葉菊及豆科植物鷹嘴豆中多糖及糖甙的化學發光分析法。?

背景技術

化學發光分析法是在一些特殊的化學反應中，反應中間體或反應產物所釋放出的化學能處于激發態(excited?state)，然后由激發態回到基態(ground?state)時所產生的一種光輻射，根據化學發光反應在某一時刻的發光強度來確定試樣中待測組分含量的方法。該方法已用于分析測定許多化學物質，但尚沒有應用于植物多糖及糖甙的測定。?

鹿草{Rhaponticum?carthamoides(Willd.)Iijin.}獨產于我國新疆阿勒泰地區，為菊科管狀花亞科漏蘆屬植物，具有抗粥樣動脈硬化、滋補強壯等多種功效，被譽為“新疆人參”，在新疆民間長期入藥，具補氣健腦功效，主治神經衰弱、食欲不振[新疆生物土壤研究所，《新疆中草藥》，新疆人民出版社，烏魯木齊，251，1975]。我們測定發現其含豐富的人體必須氨基酸、多糖、微量元素等物質，進一步研究表明鹿草多糖具有提高機體免疫功能、提高性機能、增加耐力和抗貧血等強壯和適應原樣作用[李迪明等，中藥藥理與臨床，2000，16(1)：17-181。目前文獻中報道的多糖測定方法主要是苯酚-硫酸法，鹿草多糖的測定尚未見有報道。?

甜葉菊是菊科多年生草本植物，原產于南美的巴拉圭和巴西，近年來在新疆廣為引種。甜葉菊葉子含甜菊甙(Sievioside)、甜菊雙糖甙(Steviolbioside)和甜菊三糖甙或四糖甙(Rebaudisides?A、B、C，、D，、E，F及杜爾可甙)等豐富的甜葉菊糖甙，提純的甜葉菊糖甙甜度是白糖的300-400倍，而熱量只有白糖1/300，是高甜度、低熱值的天然健康甜味劑，現已在食品、醫藥、保健等行業中廣泛應用，為糖尿病及高血壓患者帶來福因。甜葉菊糖甙常見的測定方法有質量法、堿容量法及蒽酮比色法，這些方法有的干擾多、誤差大，有的操作繁雜、耗時長[孫傳范等，食品科學2010，31(9)：338-340]。?

鷹嘴豆(CicerarietiumL)為豆科草本植物，起源于西亞和近東地區。在我國新疆有大面積栽培，其在維吾爾醫藥中的應用已有2500年的歷史，具有廣泛的藥用價值，可做利尿劑、摧奶劑、可治療失眠，預防皮膚病和防治膽病等，也是中西亞及南亞地區人們喜愛的營養食品[古麗克孜等，光譜實驗室，2000，17(4)：411-413]。我們研究發現鷹嘴豆多糖具有降血糖作用，測定其含量是鷹嘴豆糖尿病治療劑質量控制的重要依據。?

本發明為完善植物多糖及糖甙的測定方法，采用快速化學發光分析法嘗試上述三種植物中多糖及糖甙的含量測定，結果表明該方法可靠準確，可用于從上述在新疆有獨特植物資源?的鹿草、甜葉菊和鷹嘴豆中開發天然藥物的標準化研究，促進其產業化發展。?

發明內容

發明目的：提供一種快速測定植物多糖及糖甙的化學發光分析法，用于菊科植物鹿草和甜葉菊及豆科植物鷹嘴豆中多糖及糖甙的含量分析。?

文獻中報道植物多糖及糖甙的方法主要是苯酚-硫酸法——Molish反應，其中Molish試劑中的酚類物質，可以與雙氧水(H₂O₂)發生氧化還原反應，本發明根據該原理，利用Luminol-H₂O₂-Co(II)化學發光體系間接測定了鹿草和鷹嘴豆中的多糖含量以及甜葉菊糖甙的含量，測定結果與苯酚-硫酸法作對照表明該方法具有快速、線性好、誤差小、穩定可控。?

本發明采用的Luminol-H₂O₂-Co(II)化學發光體系間接測定，其工作原理是：根據Molish反應，多糖或糖甙中的葡萄糖在濃硫酸的催化作用下脫去三分子水后生成的糠醛和所加苯酚發生Molish作用縮合脫去一分子水后出現紫紅色，由此通過比色法來測定多糖的含量。?