[發(fā)明專利]一種煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210244344.8
• 申請日: 2012-07-16
• 公開（公告）號: CN102759587A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫惠青;李義強(qiáng);王鳳龍;徐光軍;王秀國;徐金麗;鄭曉
• 申請（專利權(quán)）人: 孫惠青
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法。?

背景技術(shù)

馬來酰肼(maleic?hydrazide)又名抑芽丹，為煙草抑芽劑。馬來酰肼的log?P＝-0.84，為強(qiáng)極性化合物，且煙草本身化學(xué)成分如糖類、煙堿、酚類、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)等易干擾分析檢測結(jié)果，因此在做該物質(zhì)的殘留量檢測分析時(shí)，樣品的提取處理技術(shù)很關(guān)鍵。?

目前，煙草中馬來酰肼的殘留量分析方法，其中樣品的前處理多采用在酸性(或堿性)水溶液中加熱煮沸回流的方式提取馬來酰肼。楊昀等使用鹽酸水溶液，經(jīng)沸水浴回流提取煙草中殘留的馬來酰肼，經(jīng)SPE-C₁₈柱層析凈化，HPLC法測定；張威等使用氫氧化鈉水溶液，經(jīng)蒸餾提取煙草中殘留的馬來酰肼，比色法吸光度測定。以中國煙草總公司鄭州煙草研究院牽頭起草的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《煙草及煙草制品馬來酰肼殘留量的測定高效液相色譜法》中，使用鹽酸水溶液，經(jīng)沸水浴回流提取煙草中殘留的馬來酰肼，經(jīng)SPE-C₁₈柱層析凈化后HPLC測定。上述幾種方法均存在如下幾個(gè)缺點(diǎn)：(1)較難控制溶液pH值；(2)沸水浴蒸餾回流過程操作復(fù)雜，且需要高溫加熱，存在一定安全隱患；(3)部分方法需要對提取液進(jìn)行酸堿中和，增加實(shí)驗(yàn)操作步驟，不適合大批量樣品的分析測定。?

發(fā)明內(nèi)容

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于通過大量試驗(yàn)研究，提供一種煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法。該方法不需對樣品采取加熱蒸餾、回流等手段，不需對提取液進(jìn)行酸堿中和，解決了現(xiàn)有技術(shù)方法中存在的缺點(diǎn)，樣本中殘留的馬來酰肼回收率高，且大大簡化了操作過程。?

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：?

一種煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法，包括樣品前處理、HPLC法測定步驟，所述的樣品前處理包括如下步驟：?

(1)取煙草或煙草制品置于容器中，加入酸化甲醇溶液，震蕩提取1h，然后超聲?提取10min，過濾，濾液轉(zhuǎn)入濃縮瓶后減壓濃縮蒸除甲醇，得濃縮物；所述酸化甲醇溶液是甲醇與0.2mol/L鹽酸水溶液按80∶20的體積比配制而成；?

(2)取SPE-C₁₈固相萃取柱，先后用甲醇、水預(yù)淋洗，將步驟(1)所得濃縮物轉(zhuǎn)入SPE-C₁₈固相萃取柱，用淋洗液分3次洗滌濃縮瓶，并轉(zhuǎn)入SPE-C₁₈固相萃取柱，收集淋出液，用淋洗液定容后采用HPLC法測定；所述淋洗液為0.3％(v/v)磷酸水溶液。?

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法，其中HPLC的測定條件為：?

高效液相色譜儀為Waters?Alliance?e?2695/2487；?

色譜柱為Waters?Sun?Fire?C₁₈，5.0μm，4.6×250mm；?

流動(dòng)相為體積比＝5∶95的甲醇/0.1％磷酸水溶液；?

流速為0.8mL/min；柱溫30℃，測定波長205nm，進(jìn)樣量10μL。?

在本發(fā)明的一個(gè)最優(yōu)選地的實(shí)施例中，所述煙草或煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法，包括如下步驟：?

(1)稱取煙草或煙草制品4.0g，置于250mL磨口三角瓶中，加入40mL酸化甲醇溶液，于循環(huán)式震蕩器震蕩提取1h，再于超聲波提取器超聲提取10min，過濾后量取10mL提取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上50℃減壓濃縮蒸除甲醇，得濃縮物；所述酸化甲醇溶液是甲醇與0.2mol/L鹽酸水溶液按80∶20的體積比配制而成；?

(2)取SPE-C₁₈固相萃取柱(1g/6mL)，先后用5mL甲醇、5mL水預(yù)淋洗，然后將步驟(1)所得濃縮物轉(zhuǎn)入SPE-C₁₈固相萃取柱，用8mL淋洗液分3次洗滌濃縮瓶并轉(zhuǎn)入SPE-C₁₈固相萃取柱，收集淋出液，用淋洗液定容至10mL，得樣品；所述淋洗液為0.3％(v/v)磷酸水溶液；?

(3)對步驟(2)所得樣品進(jìn)行HPLC測定，條件為：高效液相色譜儀為Waters?Alliance?e?2695/2487；色譜柱為Waters?Sun?FireC₁₈，5.0μm，4.6×250mm；流動(dòng)相為體積比＝5∶95的甲醇/0.1％磷酸水溶液；流速為0.8mL/min；柱溫30℃，測定波長205nm，進(jìn)樣量10μL。?