[發明專利]一種具有抗腫瘤作用的大豆乳清蛋白的制備方法

無效

• 申請號: 201210241288.2
• 申請日: 2012-07-12
• 公開（公告）號: CN102746375A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 王常青;王菲
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07K1/34
• 分類號: C07K1/34;C07K1/14;A61P35/00;A61P37/04;A23L1/29
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 楊耀田

技術領域

本發明涉及大豆乳清蛋白的制備方法，具體是一種具有抗腫瘤作用和增強免疫功能的大豆乳清蛋白的制備方法。?

背景技術

大豆乳清水是豆制品加工企業生產大豆分離蛋白、大豆濃縮蛋白和豆制品過程中產生的廢水，其中主要成分為大豆乳清蛋白、低聚糖等。以前，大豆乳清水一直被當作廢水排放。近年來，隨著世界各國對大豆乳清研究的不斷深入，開發利用大豆乳清水中的生理活性物質正逐漸成為研究熱點。大豆乳清蛋白占大豆蛋白的6-7％，是非酸沉蛋白，其中的主要成分是分子量在8000-22000的胰蛋白酶抑制劑(SBTI)，過去SBTI被認為是大豆中的抗營養因子，可以抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶活性，降低蛋白質的消化和吸收利用，同時它還可作用于胰腺本身，造成機能亢進，胰腺分泌過多，還可造成胰腺肥大或增生。但是近年來國內外研究發現，低濃度的SBTI具有降低多種癌癥發病率的作用，可應用為抗腫瘤藥品的原料。由于SBTI的抗營養性，如何對大豆乳清蛋白進行處理，使其既保持抗癌活性，又提高大豆乳清蛋白的利用率，一直是人們關注的焦點。?

已有大量文獻報道了乳清蛋白的回收方法。例如CN1537865公開的從大豆黃漿水提取乳清蛋白、核酸等成分；CN1954689和CN1364765公開的膜分離制備和提取大豆乳清蛋白的方法。但他們均未對SBTI的活性與抗腫瘤的關系進行研究，也沒有探討免疫功能與抗腫瘤功效的相關性。?

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種具有抗腫瘤作用的大豆乳清蛋白的制備方法。?

本發明提供的一種具有抗腫瘤作用的大豆乳清蛋白的制備方法，包括如下步驟：?

（1）制備大豆乳清濃縮液：將生產大豆分離蛋白和豆制品的大豆乳清水用常規的絮凝離心法除雜，取上清調節pH到4.3-4.5；先用截留分子量為20000-25000Da的超濾膜超濾，取濾出液再用截留分子量6000-8000Da超濾膜超濾，得到分子量為6000-25000Da的大豆乳清蛋白濃縮液；?

（2）抗腫瘤大豆乳清蛋白的制備：將大豆乳清蛋白濃縮液放入微波爐中，以2450MHz微波加熱到55-80℃取出，放入60-85℃的恒溫水浴中保溫5min-20min，然后在50℃以下真空?干燥，得到大豆乳清蛋白；該大豆乳清蛋白的胰蛋白酶抑制活性降低了40-60％。?

所述的步驟（2）中微波加熱溫度優選60-75℃；所述恒溫水浴的溫度優選65-80℃；所述的水浴保溫時間優選10min-20min。?

將大豆乳清蛋白復溶，按照3-10g/Kg·d劑量喂食試驗小鼠或大鼠，能夠顯著增強抗腫瘤效果，并提高體液免疫、細胞免疫和非特異性免疫功能。作為優質蛋白補充劑，正常人體按照30-60g/d劑量攝入該大豆乳清蛋白，具有增強體質的作用。該大豆乳清蛋白可以作為一種抗腫瘤和增強機體免疫的藥品和食品的原料。?

與現有技術相比，本發明的特點是，經兩次超濾得到分子量為6000-25000的大豆乳清蛋白濃縮液，將大豆乳清蛋白濃縮液經微波加熱到55-80℃后，再在60-85℃的水浴保溫5min-20min，使乳清蛋白中SBTI適度變性，活性下降了40-60％，同時使具有增強免疫或抗腫瘤活性基團的外展更充分，得到的低變性大豆乳清蛋白，抗腫瘤功效可以提高50-80％。?

具體實施方式

實施例1?

將生產黃豆分離蛋白的乳清廢水調pH至7.5，加入1mlo/LCaCl₂15ml/L，55℃低速攪拌20min，離心除雜后，調pH至4.3；先用截留分子量為20000-25000Da的超濾膜超濾，取濾出液用截留分子量6000-8000Da超濾膜超濾，得到乳清蛋白含量為30％、分子量為6000-25000Da的大豆乳清濃縮液。濃縮液經2450MHz微波加熱到70℃取出，放入75℃的恒溫水浴器中保溫15min，45℃真空干燥得到低變性黃豆乳清蛋白，經BAPNA（Na-苯甲酰DL-精氨酸-對硝基酰胺鹽酸鹽）法檢測，該低變性乳清蛋白中胰蛋白酶抑制活性降低了50％。?