[發(fā)明專利]一株高抑菌活性的乳酸乳球菌及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210240190.5
• 申請日: 2012-07-12
• 公開（公告）號: CN103173372A
• 公開（公告）日: 2013-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚宏明;催栩;董建輝;劉玉榮
• 申請（專利權(quán)）人: 北京偉嘉人生物技術(shù)有限公司;北京偉嘉盛邦生物技術(shù)有限公司;北京聯(lián)合盛邦生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/10;A61P31/04;A23K1/16;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種乳酸乳球菌，特別是涉及一株高抑菌活性的乳酸乳球菌及應(yīng)用。?

背景介紹?

目前飼料和畜禽養(yǎng)殖中濫用抗生素、化學(xué)合成藥物、激素、β-興奮劑、重金屬、鎮(zhèn)靜劑等促生長保健劑，導(dǎo)致一系列問題和后果，包括：畜禽產(chǎn)品中藥物殘留嚴(yán)重，直接危害人體健康，甚至產(chǎn)生“三致”，并使我國的畜禽產(chǎn)品品質(zhì)下降，缺乏市場競爭力和信任感；細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)、耐藥菌株增多，結(jié)果用藥無效，威脅人類安全等。世界衛(wèi)生組織專家認(rèn)為，畜禽產(chǎn)生的各種抗藥性病菌，可以通過食品傳給人，并產(chǎn)生很難治愈的疾病，危害人類健康。同時(shí)，金霉素、土霉素、氯霉素、喹乙醇、磺胺藥物、馬杜霉素等易殘留和毒性較大的抗生素及合成抗菌藥物的大量使用，導(dǎo)致藥物殘留增加，耐藥菌株擴(kuò)散，動(dòng)物菌群失調(diào)，動(dòng)物的免疫力受到抑制，繼發(fā)二次感染。?

鑒于上述飼料和畜禽養(yǎng)殖中存在的諸多問題，中國已啟動(dòng)“飼料安全工程”并禁用了一批毒性和殘留較大的藥物。國家《飼料工業(yè)“十二五”發(fā)展規(guī)劃》明確指出要加快新型飼料添加劑的開發(fā)與生產(chǎn)，尤其是替代抗生素的飼料添加劑的生產(chǎn)。因此，微生態(tài)制劑作為一個(gè)綠色的飼料添加劑成為產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的新型熱點(diǎn)，是替代抗生素的主要產(chǎn)品之一。?

作為消化道內(nèi)固有菌群，乳酸菌具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、抑制有害菌生長、增強(qiáng)免疫力等作用。市面上微生態(tài)制劑大多采用乳酸菌或乳酸菌于其他益生菌復(fù)配的形式，在提高畜禽采食量、防止腹瀉等方面有顯著作用。但乳酸菌作為微生態(tài)制劑產(chǎn)品也存在以下一些缺陷：乳酸菌干粉的活菌數(shù)相對較低，活菌存活時(shí)間短，抗菌譜廣同時(shí)抑菌效果好的菌種少，生產(chǎn)成本相對較高。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供了一株廣譜高抑菌活性的乳酸乳球菌(Lactococcus?lactis)vscc-4CGMCC?No.6056。?

從牛乳中分離得到一株廣譜高抑菌活性的乳酸乳球菌，經(jīng)16S?rDNA鑒定為乳酸乳球菌vscc-4(Lactococcus?lactis)，并于2012年4月26日送中國微生物菌種保藏委員會(huì)普通微生物中心保藏，編號為CGMCC?No.6056；保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院中科院微生物研究所郵編：100101電話：86-10-64807596。?

1、一株高抑菌活性的乳酸乳球菌及應(yīng)用，其特征在于：該菌為乳酸乳球菌(Lactococcus?lactis)vscc-4CGMCC?No.6056，具有較強(qiáng)的抑菌活性。?

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株高抑菌活性的乳酸乳球菌及應(yīng)用，其特征在于所述的抑菌范圍活性是指對大腸桿菌、沙門氏菌、藤黃微球菌、金黃色葡萄球菌均有抑菌作用。?

3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株高抑菌活性的乳酸乳球菌及應(yīng)用，其特征在于所述的抑菌活性是指指示菌的抑菌圈直徑達(dá)到25mm-42mm。?

4、一種含高抑菌活性的乳酸乳球菌的微生態(tài)制劑，其特征在于所述的微生態(tài)制劑是以乳酸乳球菌為主要原料，其具體生產(chǎn)工藝如下：?

1)菌種選擇：所用菌種為乳酸乳球菌(Lactococcus?lactis)vscc-4CGMCC?No.6056；?

2)斜面培養(yǎng)：將-80℃甘油管保藏的乳酸乳球菌(Lactococcus?lactis)vscc-4CGMCCNo.6056接種于固體斜面培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24-30h；?

3)種子培養(yǎng)：將斜面培養(yǎng)的菌種接種至液體培養(yǎng)基中，30℃靜置培養(yǎng)8-12h；?

4)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將一級種子液按1％接種量接種于發(fā)酵罐培養(yǎng)液中，30℃，100-200rpm發(fā)酵10-20h；?

上述培養(yǎng)基成分為：蔗糖4-6g/L，胃蛋白胨12-14g/L，酵母膏4-8g/L，磷酸二氫鉀5-9g/L，氯化鈉2-7g/L，七水合硫酸鎂0.2-1.0g/L，pH調(diào)至7.0-7.35；斜面培養(yǎng)基另添加1.5％瓊脂粉。?

5)菌體富集：將發(fā)酵液通入管式離心機(jī)中，15000-20000rpm離心收集菌體。?

6)冷凍干燥：將離心后的菌泥與等體積的10％D-山梨醇溶液混合均勻后，置于冷凍干燥機(jī)內(nèi)凍干。?

7)凍干菌粉的后處理：以葡萄糖為載體，與凍干菌粉混合，使混合后的微生態(tài)制劑活菌數(shù)達(dá)到1萬億cfu/g。?

5、一種含高抑菌活性的乳酸乳球菌在微生態(tài)制劑作為飼料添加劑中的用量如下：?

對于正常種禽，添加量為飼料重的0.1％；?

對于腹瀉種禽，添加量為飼料重的0.2％；?

對于正常仔豬，添加量為飼料重的0.1％；?