[發明專利]氨基甲酸乙酯檢測試紙的制備及其檢測方法

無效

• 申請號: 201210237671.0
• 申請日: 2012-07-04
• 公開（公告）號: CN102735830A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 郭明;嚴鋒;李博斌;敬嬌;梁東軍
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學
• 主分類號: G01N33/52
• 分類號: G01N33/52
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 周烽

1.一種氨基甲酸乙酯試紙的制備方法，其特征是按如下步驟進行：

(1)備料：活性≥220u/g的乙酰膽堿酯酶，純度為99％的氨基甲酸乙酯，試紙的紙基為吸水性好的中速定性濾紙，底物為1g·L^-1的2，6-二氯靛酚乙酸酯；

(2)酶溶液的配制：乙酰膽堿酯酶的用量10u，體積比為5％的戊二醛2μL，質量比為1％的BSA?10μL，配成70μL的酶溶液；

(3)試紙的制備：將上述的酶溶液與定性濾紙在3℃的條件下常規固定化8h，得到氨基甲酸乙酯檢測試紙。

2.用權利要求書1所述的氨基甲酸乙酯試紙制備方法制得的試紙，其特征是檢測方法按如下步驟進行：

(1)標準檢測溶液的制備：用純度為99％以上的氨基甲酸乙酯配制成濃度分別為0、0.1mg·L^-1、0.2mg·L^-1、0.3mg·L^-1、0.4mg·L^-1的五種水溶液，水為去離子水；

(2)標準比色卡的制作：將上述五種氨基甲酸乙酯濃度的標準水溶液用制備的酶片試紙依次檢測，試紙上會呈現五種不同的顏色，以相應濃度的標準溶液的檢測情況所呈現的不同顏色制作成標準色卡；濃度為零時，試紙呈現深藍色；濃度為0.1mg·L^-1時，試紙呈現的淡藍色；濃度為0.2mg·L^-1時，藍色更淡，幾乎分辨不清；濃度為0.3mg·L^-1時，試紙呈現淡淡的橙紅色；濃度為0.4mg·L^-1時，試紙呈現橙紅色；

(3)試紙有效性的確認：在對待測樣品進行檢測之前，首先對試紙的有效性進行確認，對于同批次制作的試紙至少進行一次確認；隨機抽取一張制作好的試紙，滴加半滴到一滴上述氨基甲酸乙酯濃度的標準溶液，再向試紙上滴加半滴到一滴底物溶液，觀察顏色變化并與標準比色卡上的氨基甲酸乙酯濃度的顏色對比，若試紙變色達到標準程度，試紙檢測效果良好，可用于檢測；若顏色比標準色度變淡或不變色，則試紙失效，應廢棄不用；

(4)比色與含量的框定：將待測樣品進行檢測，以試紙所呈現的顏色與標準比色卡對照，即得出所測樣品中氨基甲酸乙酯的大致含量。