[發明專利]可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法

有效

• 申請號: 201210235696.7
• 申請日: 2012-07-06
• 公開（公告）號: CN103518528A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 劉宗翰
• 申請（專利權）人: 豐苗生物科技股份有限公司
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

技術領域

本發明涉及一種真菌培養方法，特別涉及一種牛樟菌培養方法。

背景技術

由于牛樟芝所含有的三萜類成分已被證實對于人體免疫力的提升與許多癌癥的治療都具有療效，因此，有許多生技廠商開始投注大量研究資源開發牛樟芝相關醫藥品或保健品。

但是因為野生牛樟芝子實體取得不易，且價格昂貴，再加上野生牛樟芝子實體的三萜類不易萃取釋出，其萃取成本高。為取得大量牛樟芝三萜類成分，業者逐漸朝向實驗室培養方面進行研究，希望通過實驗室人工培養的方式，來大量培養生產牛樟菌，以萃取其三萜類成分。

目前的主要培養方式大多是采用固態培養方式，目的在于大量培養出牛樟菌菌絲體，然后再由這些菌絲體萃取出所需的三萜類成分，但是在進行固態培養時發現，牛樟菌菌絲在分散生長布滿固態培養基表面后，其生長速度就會開始減慢。且經研究發現，由牛樟菌菌絲體萃取出的三萜類成分含量，遠不及牛樟芝子實體萃取出的三萜類含量，因此，如何提高人工培養的牛樟菌三萜類含量，是目前牛樟菌相關產業正積極研究的方向。

發明內容

本發明的目的在于提供一種可提高人工培養的牛樟菌的三萜類含量的牛樟菌培養法。

本發明可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，依序包含以下步驟：(A)將含有牛樟菌活性菌絲的培養載體接種至漂浮培養基的步驟，所述漂浮培養基包括含有牛樟木萃取液的營養液，及沉浸于該營養液中的固態營養基質團塊，該培養載體局部浸泡在營養液中，且部分牛樟菌活性菌絲外露于營養液液面上方，而部分牛樟菌活性菌絲局部浸泡在營養液中；(B)在供氧且適合牛樟菌生長的培養環境溫度條件下進行初期避光培養的步驟，促使外露于營養液液面上方的牛樟菌活性菌絲增生，而于該培養載體上聚集成局部外露于營養液液面上方的牛樟菌菌塊，且使該牛樟菌菌塊的部分活性菌絲增生附著于該固態營養基質團塊擷取養分；(C)在避光環境下進行休眠的步驟，密封培養環境而停止供氧，并將培養環境溫度調降至休眠溫度，誘使牛樟菌進入休眠期，并維持休眠期預定期間；(D)在避光環境下誘使牛樟菌重新生長的步驟，對該培養環境重新供氧，且將培養環境溫度調升至適合牛樟菌生長的溫度，誘使該牛樟菌菌塊位于液面上的孢子萌發生長成活性菌絲，并維持此生長期預定時間；及(E)重復循環該步驟(C)與該步驟(D)預定次數。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(A)的營養液液面會高出該固態營養基質團塊頂緣，該培養載體局部沉浸在營養液中，而疊靠于該固態營養基質團塊頂緣。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(A)的漂浮培養基的營養液液面高出該固態營養基質團塊頂緣的距離范圍介于0.5-2cm之間。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(A)中局部浸泡于營養液中的培養載體間隔位于該固態營養基質團塊旁側。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(A)的漂浮培養基裝在培養容器中，該步驟(B)與該步驟(D)還會分別在牛樟菌的培養期期間，調控該培養容器所在的培養環境的濕度，使培養容器中的營養液保持局部浸泡該牛樟菌菌塊。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(B)與該步驟(D)的培養環境溫度較佳范圍介于15-25℃之間。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(C)的休眠溫度范圍介于4-10℃之間。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(C)的休眠期時間為24小時以上。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，該步驟(C)休眠期的較佳時間長度為72小時。

本發明所述可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法，所述漂浮培養基由提供碳源與氮源的五谷雜糧，及枸杞、土肉桂、提供胡蘿卜素與維生素的蔬菜汁、牛樟木萃取液與二次蒸餾水混合并經高溫滅菌處理制成。

本發明的有益效果在于：通過讓牛樟菌菌塊局部外露于營養液液面上，而局部菌絲附著于固態營養基質團塊，以及交替休眠與生長的漂浮培養方法設計，可誘使牛樟菌在短期間內長出層疊狀類子實體產物的菌塊，且所培養出的牛樟菌菌塊的三萜類含量會明顯高于一般固態培養方式，并適用于人工大量培養。

附圖說明

圖1是本發明可提高三萜類含量的漂浮式牛樟菌培養法的較佳實施例的步驟流程圖；

圖2是該較佳實施例的步驟示意圖；